Collagenase D是一种用于消化胶原和细胞外基质（ECM）的酶。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Collagenase D is an enzyme used to digest collagen and extracellular matrix (ECM). Collagenase D is widely used to digest and dissociate various organs and tissues, including lung, heart, liver, kidney, brain, muscle, bone, adipose tissue, cartilage, mammary tissue, placenta, blood vessels, and tumors, to prepare single-cell suspensions for primary cell culture establishment and subsequent analysis.
Collagenase D是一种用于消化胶原和细胞外基质（ECM）的酶。Collagenase D广泛用于消化和解离多种器官及组织，包括肺、心脏、肝脏、肾脏、脑、肌肉、骨骼、脂肪组织、软骨、乳腺组织、胎盘、血管和肿瘤，以制备单细胞悬液，用于原代细胞培养体系的建立及后续分析。
本方案来自文献，请根据您的具体需求修改[1][2]。
1.储存液配制
1）用HBSS（含Ca2+，Ca2+是胶原酶D的激活剂）溶解Collagenase D，震荡充分溶解后制备成100×的储存液。
2）使用0.22μm滤膜过滤除菌，立即使用或分装成小份量，于-20°C避光冻存。
注：建议仅重悬需要立即使用的冻干粉的量，避免反复冻融。Collagenase D的工作浓度在0.5-2.5mg/ml，需要根据特定的实验条件或参考相应的文献资料确定最佳工作浓度。
2.组织分离
1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成小块。
2）加入足量HBSS浸没组织块，并加入Collagenase D至需要的工作浓度。
3）在水平摇床上37℃孵育1-2h，通过细胞过滤器收集单个细胞。（3mM的CaCl2有助于提高分离效率，未完全解离的组织可另外添加适量的新鲜Collagenase D工作液于37°C继续消化，可使用5-10mM的EDTA 终止Collagenase D的活性）
4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞，加入细胞培养液重悬制成单细胞悬液。
References:
[1] Kushwah R, Hu J. Analysis of pulmonary dendritic cell maturation and migration during allergic airway inflammation. J Vis Exp. 2012;(65):e4014.
[2] Yang, Nan et al. “Quantitative live imaging of Venus::BMAL1 in a mouse model reveals complex dynamics of the master circadian clock regulator.” PLoS genetics vol. 16,4 e1008729. 30 Apr. 2020.
| Cas No. | SDF | ||
| 别名 | 胶原酶D | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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