Luciferase是一种能够催化生物发光反应的酶。
Cas No.:9014-00-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Luciferase is an enzyme capable of catalyzing bioluminescent reactions. Luciferase catalyzes the oxidative decarboxylation of the substrate luciferin to convert chemical energy into light energy, and it can be used to reflect the expression level of a target gene by being coupled with that gene. Luciferase can be used in research related to gene expression regulation and in vivo imaging[1-4].
References:
[1] Schramm S, Al-Handawi MB, Karothu DP, et al. Mechanically Assisted Bioluminescence with Natural Luciferase. Angew Chem Int Ed Engl. 2020 Sep 14;59(38):16485-16489.
[2] Tu SC. Activity coupling and complex formation between bacterial luciferase and flavin reductases. Photochem Photobiol Sci. 2008 Feb;7(2):183-8.
[3] Dupont S. Luciferase Reporter Assays to Determine YAP/TAZ Activity in Mammalian Cells. Methods Mol Biol. 2019;1893:121-135.
[4] Yang T, Yuan Y, Ma F. Luciferase Reporter Systems in Investigating Interferon Antiviral Innate Immunity. Methods Mol Biol. 2025;2854:127-141.
Luciferase是一种能够催化生物发光反应的酶。Luciferase可催化底物荧光素氧化脱羧将化学能转化为光能，同时通过偶联目的基因以反映其表达水平。Luciferase可用于基因表达调控和活体成像的相关研究[1-4]。
基于Luciferase建立Luc@CaP纳米颗粒的持久生物发光成像检测方法[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1. 试剂准备：配制浓度为400μg/mL的Luciferase溶液；使用磷酸钙作为矿化载体，通过仿生矿化法制备Luc@CaP纳米颗粒（Luc@CaP NPs），最佳矿化时间为4小时；合成并配制浓度为300μM的探针Cys(SEt)-Lys-CBT（CKCBT）或300μM的氨基荧光素（Am-luciferin）工作液；准备含1mM ATP和10mM Mg²⁺的检测缓冲液。
2. 体外细胞水平检测：
（1）培养细胞细胞系，接种于96孔板（每孔约2×10⁶个细胞）。
（2）向细胞中加入400μg/mL的Luc@CaP NPs，孵育8小时以实现细胞对内化摄取。
（3）吸去多余试剂，向孔板中加入300μM的CKCBT或Am-luciferin探针工作液。
（4）用活体成像系统，在0、1、2、4、6、7小时等特定时间点进行实时生物发光成像（BLI），记录并分析发光强度的动态变化。
3. 体内动物水平检测
（1）构建原位癌模型，向BALB/c小鼠的注射5×10⁶个癌细胞。
（2）待肿瘤直径长至约7-8mm时。通过瘤内（i.t.）注射给予4.0mg/kg的Luc@CaP NPs。
（3）给药20分钟后，通过腹腔（i.p.）注射给予200μmol/kg的CKCBT或50μmol/kg的Am-luciferin。
（4）使用小动物成像系统在长达120分钟的时间窗口内连续记录肿瘤部位的生物发光信号。
注意事项：
（1）动物实验需要符合动物福利。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Hong Y, Yang Y, Wang C, et al. Luciferase-Loaded Calcium Phosphate Nanoparticles for Persistent Bioluminescence Imaging of Orthotopic Breast Tumors. Anal Chem. 2024 Sep 10;96(36):14320-14325.
| Cas No. | 9014-00-0 | SDF | |
| 别名 | 荧光素酶 | ||
| 分子式 | 分子量 | ||
| 溶解度 | Water: 50 mg/mL | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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