(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110
(Synonyms: (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rhodamine110|bis-(CBZ-L-alanyl-L-arginine amide) Rhodamine 110) 目录号 : GC11847
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(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110是一种灵敏的荧光弹性蛋白酶底物，无色且不发荧光的 (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110被弹性蛋白酶选择性裂解，产生强荧光化合物罗丹明110，罗丹明110的激发/发射波长为485nm/525nm。
Cas No.:149695-85-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110 is a sensitive, non-fluorescent elastase substrate. Upon selective cleavage by elastase, the colorless (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110 yields the strongly fluorescent compound Rhodamine 110, which exhibits excitation and emission wavelengths of 485nm and 525nm, respectively[1, 2]. (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110 demonstrates high specificity for elastase with minimal cross-reactivity, making it suitable for the precise quantitative analysis of enzymatic activity within complex biological samples. For instance, (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110 can be utilized to determine the enzymatic activity of neutrophil elastase (NE) in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of mice infected with the influenza A virus (IAV)[3, 4].
References:
[1] Johnson A F, Struthers M D, Pierson K B, et al. Nonisotopic DNA detection system employing elastase and a fluorogenic rhodamine substrate[J]. Analytical chemistry, 1993, 65(17): 2352-2359.
[2] Khatib-Massalha E, Michelis R, Trabelcy B, et al. Free circulating active elastase contributes to chronic inflammation in patients on hemodialysis[J]. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 2018, 314(2): F203-F209.
[3] Sule G, Abuaita B H, Steffes P A, et al. Endoplasmic reticulum stress sensor IRE1α propels neutrophil hyperactivity in lupus[J]. The Journal of clinical investigation, 2021, 131(7).
[4] Almutairi F, Sarr D, Tucker S L, et al. RGS10 reduces lethal influenza infection and associated lung inflammation in mice[J]. Frontiers in Immunology, 2021, 12: 772288.
(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110是一种灵敏的荧光弹性蛋白酶底物，无色且不发荧光的 (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110被弹性蛋白酶选择性裂解，产生强荧光化合物罗丹明110，罗丹明110的激发/发射波长为485nm/525nm[1, 2]。(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110对弹性蛋白酶具有高度特异性，交叉反应性低，能够用于复杂生物样本中酶活性的精准定量分析，例如(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110能够用于测定流感病毒（IAV）感染小鼠支气管肺泡灌洗液（BALFs）中的中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）酶活性[3, 4]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液配制
（1）储存液：用DMSO/DMF溶解(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110，配制1mM母液。
注意：未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液：用实验缓冲液稀释母液到所需的工作浓度，例如：50μM[1]。
注意：最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2. 采用(Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rh110测定中性粒细胞弹性蛋白酶活性[1](来自文献,仅做参考)
（1）将中性粒细胞接种到96孔板中，向孔板中加入荧光弹性蛋白酶底物 (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)₂Rh110，使其终浓度达到50μM。
（2）用抑制剂和RNP-抗RNP复合物对细胞进行处理。
（3）用酶标仪在激发波长485nm和发射波长520nm处进行荧光检测。弹性蛋白酶活性以处理组荧光强度相对于对照组荧光强度的变化倍数来表示。
References:
[1] Yeo I J, Lee M J, Baek A, et al. A dual inhibitor of the proteasome catalytic subunits LMP2 and Y attenuates disease progression in mouse models of Alzheimer’s disease[J]. Scientific reports, 2019, 9(1): 18393.
| Cas No. | 149695-85-2 | SDF | |
| 别名 | (Z-Ala-Ala-Ala-Ala)2Rhodamine110|bis-(CBZ-L-alanyl-L-arginine amide) Rhodamine 110 | ||
| 化学名 | N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-alanyl-L-alanyl-L-alanyl-N-[3-oxo-6’-[[N-[N-[N-[N-[(phenylmethoxy)carbonyl]-L-alanyl]-L-alanyl]-L-alanyl]-L-alanyl]amino]spiro[isobenzofuran-1(3H),9’-[9H | ||
| Canonical SMILES | O=C(O1)C2=CC=CC=C2C31C4=C(C=C(NC(C(C)NC(C(C)NC(C(C)NC(C(C)NC(OCC5=CC=CC=C5)=O)=O)=O)=O)=O)C=C4)OC6=C3C=CC(NC(C(C)NC(C(C)NC(C(C)NC(C(C)NC(OCC7=CC=CC=C7)=O)=O)=O)=O)=O)=C6 | ||
| 分子式 | C60H66N10O15 | 分子量 | 1167.2 |
| 溶解度 | ≤2mg/ml in DMSO;2mg/ml in dimethyl formamide | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 856.8 μL | 4.2838 mL | 8.5675 mL |
| 5 mM | 171.4 μL | 856.8 μL | 1.7135 mL |
| 10 mM | 85.7 μL | 428.4 μL | 856.8 μL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >95.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet