X-Gal

目录号: GC15620纯度: >98.00%同义词: 5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷,BCIG
X-Gal被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,因此常用于转基因筛选试验,如β-半乳糖苷酶的蓝白斑筛选或原位染色试验。

X-Gal
Cas No.: 7240-90-6
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    641, 529–536 (2025)
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    628, 630–638 (2024)
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    632, 686–694 (2024)
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    618, 1017–1023 (2023)
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    610, 366–372 (2022)
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    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
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    183(7):1867-1883 (2020)
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    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
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    Science
    387(6734) (2025)
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    35, 97–116 (2025)
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    34, 683–706 (2024)
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    33, 273–287 (2023)
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    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
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    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
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    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

X-Gal is hydrolyzed blue by β-galactosidase, so it is often used in transgenic screening tests, such as blue-white spot screening or in situ staining assay for β-galactosidase [1-2].

X-gal (1 mg/ml / 0.3 mg/ml) staining is also used to analyze protein expression pattern. It can be used to detect expression pattern of beta-galactosidase in vivo [3-4]. X-gal (1 mg/ml) can also be used to visualize LacZ activity in mouse embryos and adult mice[5-6].

References:

[1]. Green MR, Sambrook J. Screening Bacterial Colonies Using X-Gal and IPTG: α-Complementation. Cold Spring Harb Protoc. 2019 Dec 2;2019(12). doi: 10.1101/pdb.prot101329. PMID: 31792144.

[2]. Trimborn L, Hoecker U,et,al. A Simple Quantitative Assay for Measuring β-Galactosidase Activity Using X-Gal in Yeast-Based Interaction Analyses. Curr Protoc. 2022 May;2(5):e421. doi: 10.1002/cpz1.421. PMID: 35567769.

[3]. Kokubu H, Lim J. X-gal Staining on Adult Mouse Brain Sections. Bio Protoc. 2014;4(5):e1064. doi: 10.21769/bioprotoc.1064. Epub 2014 Mar 5. PMID: 27390760; PMCID: PMC4932900.

[4]. Burn SF. Detection of β-galactosidase activity: X-gal staining. Methods Mol Biol. 2012;886:241-50. doi: 10.1007/978-1-61779-851-1_21. PMID: 22639266.

[5]. Watanabe-Takano H, Fukumoto M, et,al. Protocol for whole-mount X-gal staining combined with tissue clearing in embryo and adult mouse using CUBIC. STAR Protoc. 2022 Jan 20;3(1):101127. doi: 10.1016/j.xpro.2022.101127. PMID: 35118431; PMCID: PMC8792446.

[6]. Gierut JJ, Jacks TE, et,al. Whole-mount X-Gal staining of mouse tissues. Cold Spring Harb Protoc. 2014 Apr 1;2014(4):417-9. doi: 10.1101/pdb.prot073452. PMID: 24692489; PMCID: PMC4169236.

X-Gal被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,因此常用于转基因筛选试验,如β-半乳糖苷酶的蓝白斑筛选或原位染色试验[1-2]

X-gal (1mg /ml / 0.3 mg/ml)染色法可以用于分析蛋白表达谱。它可用于检测体内β -半乳糖苷酶的表达模式[3-4]。X-gal (1 mg/ml)也可用于观察小鼠胚胎和成年小鼠的LacZ活性[5-6]

实验参考方法 Experimental Reference Method

X-gal储备溶液配置:

用二甲基甲酰胺溶解X-gal制备20mg/ml存储溶液。称取20g X-gal,加入1L二甲基甲酰胺(DMF),溶解后装入瓶中,用铝箔包好避光,-20℃保存。不需过滤除菌。

成年小鼠脑切片X-gal染色[1]

1.    小鼠用PBS灌注5分钟,然后用4% PFA/PBS灌注5分钟。

2.    将小鼠脑解剖出来,用4% PFA/PBS在4℃下固定4小时。

3.    固定脑用PBS洗涤三次,然后用20%的蔗糖孵育过夜(或直到样品下沉),然后用30%的蔗糖孵育过夜。

4.    大脑安装在低温模具上,并在-80℃保存。

5.    使用低温恒温器制作40 μm的cyro切片,并安装在玻片上。

6.    玻片用染色缓冲液在室温下洗涤10分钟。

7.    玻片加入1 mg/ml X-gal,在37℃下加入5 mM铁氰化钾和5 mM铁氰化钾的染色缓冲液中孵育,直至显色。这一步通常需要3个小时才能完成。不要让样品干燥。每张玻片使用100-200 μl X-gal溶液。

8.    用PBS洗涤染色样品三次(每次5分钟)。

9.    载玻片用系列乙醇(50%,75%,90%,100%,各2分钟)脱水。

10.  载玻片用中性树胶封片剂保存,可以在室温下储存或者用于成像。

Reference:

[1]. Kokubu H, Lim J. X-gal Staining on Adult Mouse Brain Sections. Bio Protoc. 2014;4(5):e1064. doi: 10.21769/bioprotoc.1064. Epub 2014 Mar 5. PMID: 27390760; PMCID: PMC4932900.

产品文档 Product Documents

Purity:>98.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
7240-90-6
同义词
5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷,BCIG
化学名
(2S,3R,4S,5R,6R)-2-[(5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl)oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol
SMILES
C1=CC(=C(C2=C1NC=C2OC3C(C(C(C(O3)CO)O)O)O)Cl)Br
分子式
C14H15BrCINO6
分子量
408.63 g/mol
溶解性
≥ 109.4 mg/mL in DMSO, ≥ 3.7 mg/mL in EtOH with ultrasonic and warming
保存条件
store at -20°C,protect from light
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备 RT,或根据请求配备蓝冰。

计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol