Sel-green是一种选择性的硒醇荧光探针,Sel-green(激发/发射波长约为370/502nm)可用于定量硒酶硫氧蛋白还原酶中的Sec含量并对活细胞中的Sec进行荧光成像。
Cas No.:1574299-37-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Sel-green is a selective fluorescent probe for selenol. Sel-green (with an excitation/emission wavelength of approximately 370/502nm) can be used to quantify the Sec content in the selenoenzyme thioredoxin reductase and to perform fluorescence imaging of Sec in live cells. Sel-green can be applied in related research on cancer and cell biology[1].
References:
[1] Zhang B, Fang J. Assay of selenol species in biological samples by the fluorescent probe Sel-green. Methods Enzymol. 2022;662:259-273.
Sel-green是一种选择性的硒醇荧光探针,Sel-green(激发/发射波长约为370/502nm)可用于定量硒酶硫氧蛋白还原酶中的Sec含量并对活细胞中的Sec进行荧光成像。Sel-green可用于癌症和细胞生物学研究的相关研究[1]。
Sel-green探针用于活细胞硒醇荧光成像[1]
本实验方案根据研究内容整理,仅供参考,请根据实际需求进行调整。
1.试剂准备:将Sel-green溶解于二甲基亚砜(DMSO)中,配制成适当浓度的储备液(如5-10mM),使用时用细胞培养基稀释至工作浓度20µM;使用细胞培养基(含10%胎牛血清FBS;2mM谷氨酰胺;100U/mL青霉素/链霉素)配制含硒化合物(如Na₂SeO₃、(Sec)₂等)的处理液,工作浓度通常为5µM。
2. 细胞培养与铺板:将细胞在37°C、5% CO₂条件下,用上述完全培养基进行常规培养。在成像实验前一天,将细胞以适当密度接种于12或24孔板中,每孔加入适量培养基(如12孔板加1mL,24孔板加0.5mL),培养24小时使细胞贴壁。
3.细胞处理与探针孵育:
(1)内源性硒醇诱导:若要检测内源性硒代半胱氨酸(Sec),可在成像前用Na₂SeO₃(5µM)处理细胞1小时或12小时,以增加细胞内Sec水平。
(2)外源性硒醇检测:若要检测外源性Sec,可用(Sec)₂(5µM)处理细胞1小时。
(3)不同硒化合物代谢研究:用目标硒化合物(如SeO₂、Na₂SeO₃、DBDS等;5µM)处理细胞1、6或12小时。
4. 荧光成像:向清洗后的细胞中加入用培养基新鲜配制的Sel-green工作液(20µM),在37°C下避光孵育30分钟。孵育结束后,用PBS清洗细胞三次,以去除未进入细胞的探针。立即使用荧光成像系统进行观察和图像采集。Sel-green的激发/发射波长约为370/502nm,产生绿色荧光。
注意事项:
(1)Sel-green是首个可在生理条件(pH=7.4)下工作的选择性硒醇荧光探针,对硒代半胱氨酸(Sec)的响应信号比普通生物硫醇(如Cys, GSH)高100倍以上。
(2)Sel-green的潜在缺点是其在细胞成像中的灵敏度相对较低,这可能限制其在体内低浓度内源性硒醇检测中的应用
(3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Zhang B, Ge C, Yao J, et al. Selective selenol fluorescent probes: design, synthesis, structural determinants, and biological applications. J Am Chem Soc. 2015 Jan 21;137(2):757-69.
| Cas No. | 1574299-37-8 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=S(C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O)(NC2=CC3=CC=C(N(CC)CC)C=C3OC2=O)=O | ||
| 分子式 | C19H18N4O8S | 分子量 | 462.43 |
| 溶解度 | 储存条件 | Store at -20°C | |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1625 mL | 10.8124 mL | 21.6249 mL |
| 5 mM | 432.5 μL | 2.1625 mL | 4.325 mL |
| 10 mM | 216.2 μL | 1.0812 mL | 2.1625 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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