N3-C2-NHS ester是一种含有叠氮基团（N3）和N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）的双功能连接分子，被广泛用于生物偶联及蛋白质或肽类化合物的修饰与标记。
Cas No.:850180-76-6
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
_1-3.$$$39978408@51.jpg');)
_1-9.$$$38538795@65.jpg');)
_1-9.$$$39112701@51.jpg');)
_1-7.$$$37316672@70.jpg');)
_366-372.$$$36198801@70.jpg');)
.$$$38565142@65.jpg');)
_1867-1883.$$$33248023@67.jpg');)
_eads6055.$$$39977546@45.jpg');)
_eadm9805.$$$40080571@45.jpg');)
_eadj3020.$$$39666821@45.jpg');)
_1-20.$$$39757301@28.jpg');)
_1-24.$$$38898113@28.jpg');)
_273-287.$$$36806353@46.jpg');)
_1-16.$$$37156877@44.jpg');)
_1-19.$$$37460805@44.jpg');)
_1291-1307.$$$34518654@46.jpg');)
N3-C2-NHS ester is a bifunctional linker molecule containing both an azide group (N3) and an N-hydroxysuccinimide ester (NHS ester), widely used in bioconjugation and for the modification and labeling of proteins or peptide compounds. The NHS ester efficiently reacts with primary amine groups to form stable amide bonds, while the azide group enables specific conjugation with alkynes via copper-catalyzed or copper-free click reactions[1,2]. N3-C2-NHS ester is suitable for fields including protein labeling, click chemistry, nucleic acid modification, and biomolecular crosslinking (such as antibody-drug conjugates (ADCs))[3,4,5].
Reference:
[1] NANDA J S, LORSCH J R. Labeling a protein with fluorophores using NHS ester derivitization[J]. Methods in Enzymology, 2014, 536: 87-94.
[2] LIANG L, ASTRUC D. The copper (I)-catalyzed alkyne-azide cycloaddition (CuAAC)“click” reaction and its applications. An overview[J]. Coordination Chemistry Reviews, 2011, 255(23-24): 2933-2945.
[3] KANG M S, KONG T W, KHOO J Y, et al. Recent developments in chemical conjugation strategies targeting native amino acids in proteins and their applications in antibody–drug conjugates[J]. Chemical Science, 2021, 12(41): 13613-13647.
[4] HOLMES K L, LANTZ L M. Protein labeling with fluorescent probes[J]. Methods in Cell Biology, 2001, 63: 185-204.
[5] LUTZ J F, ZARAFSHANI Z. Efficient construction of therapeutics, bioconjugates, biomaterials and bioactive surfaces using azide–alkyne “click” chemistry[J]. Advanced Drug Delivery Reviews, 2008, 60(9): 958-970.
N3-C2-NHS ester是一种含有叠氮基团（N3）和N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester）的双功能连接分子，被广泛用于生物偶联及蛋白质或肽类化合物的修饰与标记。NHS ester可高效与伯胺基团反应形成稳定的酰胺键，而叠氮基则可通过铜催化或无铜点击反应与炔烃实现特异性偶联[1,2]。N3-C2-NHS ester适用于蛋白质标记、点击化学、核酸修饰和生物大分子交联（如抗体药物偶联（ADCs））等领域[3,4,5]。
使用N3-C2-NHS ester作为连接分子的实验步骤[1]：
1. 合成线性ASO-多肽偶联物
（1）在3’-氨基修饰C7 CPG上合成硫代磷酸DNA寡核苷酸，并使用标准亚磷酰胺化学方法将C6-NHS phosphoramidite linker偶联至5’末端。
（2）将1µM CPG固定化寡核苷酸与1.2mg合成多肽在40µL含2% DIPEA的干燥DMF中，25℃振荡反应24h，经裂解脱保护后通过HPLC纯化及ESI-MS表征。
2. 3’末端叠氮化修饰
（1）将纯化后的肽-寡核苷酸偶联物（10nM）和N3-C2-NHS ester（3μM）在PBS与DMSO混合溶剂（50μL 1 × PBS和50μL 1 × DMSO）中于25℃反应24h。
（2）反应获得3’-叠氮功能化线性ASO偶联物，经HPLC纯化及ESI-MS表征确认结构。
3. 点击化学环化
（1）在200µL含6%乙腈水溶液中，加入5µL 20mM CuSO4、6µL 20mM TCEP和10µL 200mM NaHCO3催化体系，25℃反应4h。
（2）环化产物通过HPLC或凝胶回收方法纯化，并利用ESI-MS和PAGE凝胶进一步表征。
Reference:
[1] WANG Z, FAN X, MU G, et al. Cathepsin B-activatable cyclic antisense oligonucleotides for cell-specific target gene knockdown in vitro and in vivo[J]. Molecular Therapy Nucleic Acids, 2023, 33: 548-558.
| Cas No. | 850180-76-6 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C(ON1C(CCC1=O)=O)CCN=[N+]=[N-] | ||
| 分子式 | C7H8N4O4 | 分子量 | 212.16 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 4.7134 mL | 23.5671 mL | 47.1342 mL |
| 5 mM | 942.7 μL | 4.7134 mL | 9.4268 mL |
| 10 mM | 471.3 μL | 2.3567 mL | 4.7134 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >95.00% Appearance: An oil
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet