Z-Leu-Arg-AMC是4-甲基香豆素基-7-酰胺(AMC)亮氨酸衍生物,带有羧基苯甲酰(Z)。
Cas No.:156192-32-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Z-Leu-Arg-AMC is a 4-methylcoumarinyl-7-amide (AMC) leucine derivative with carboxybenzoyl (Z). Z-Leu-Arg-AMC can be cleaved by cathepsin B, L, and S, and is mainly used to detect the enzyme activity of cysteine proteases such as cathepsin B[1][2][3].
References:
[1] Yoon MC, Phan V, Podvin S, Mosier C, O'Donoghue AJ, Hook V. Distinct Cleavage Properties of Cathepsin B Compared to Cysteine Cathepsins Enable the Design and Validation of a Specific Substrate for Cathepsin B over a Broad pH Range. Biochemistry. 2023;62(15):2289-2300.
[2] Song Y, Fan H, Anderson MJ, et al. Electrochemical Activity Assay for Protease Analysis Using Carbon Nanofiber Nanoelectrode Arrays. Anal Chem. 2019;91(6):3971-3979.
[3]BRENDA Enzyme Database. Cathepsin L (EC 3.4.22.15) substrate information. Technische Universität Braunschweig. Accessed March 10, 2026. https://www.brenda-enzymes.org
Z-Leu-Arg-AMC是4-甲基香豆素基-7-酰胺(AMC)亮氨酸衍生物,带有羧基苯甲酰(Z)。Z-Leu-Arg-AMC可以被组织蛋白酶B、L和S切割,主要用于检测组织蛋白酶B等半胱氨酸蛋白酶的酶活性[1][2][3]。
Cathepsin B活性检测[1-2]
本方案来自文献,请根据您的具体需求修改。
1.制备底物工作液
(1)配置储存液:使用DMSO溶解Z-Leu-Arg-AMC配置储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20°C或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)配置工作液:使用MES缓冲液(含有5mM二硫苏糖醇(DTT)和25mM 2-(4-Morpholino)乙烷磺酸,pH=5.0)稀释储存液。
注意:工作液现配现用,4 ℃或冰上短暂保存。
2.在MES缓冲液中37℃预孵育活化cathepsin B,浓度通常为0.1-1μg/mL。
3.准备一个96孔板,包括:
样品空白孔:仅Z-Leu-Arg-AMC底物,浓度为40-100μM。
底物空白孔:仅活化的cathepsin B,浓度为0.1-1μg/mL。
实验孔: Z-Leu-Arg-AMC底物与cathepsin B混合液,浓度分别为0.1-1μg/mL和40-100μM。
4. 96孔板37℃孵育10-60min,酶标仪检测350-360nm激发下440-460nm处的荧光强度。
注意事项:
1)荧光底物存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Yoon MC, Phan V, Podvin S, Mosier C, O'Donoghue AJ, Hook V. Distinct Cleavage Properties of Cathepsin B Compared to Cysteine Cathepsins Enable the Design and Validation of a Specific Substrate for Cathepsin B over a Broad pH Range. Biochemistry. 2023;62(15):2289-2300.
[2] Song Y, Fan H, Anderson MJ, et al. Electrochemical Activity Assay for Protease Analysis Using Carbon Nanofiber Nanoelectrode Arrays. Anal Chem. 2019;91(6):3971-3979.
| Cas No. | 156192-32-4 | SDF | |
| 分子式 | C30H38N6O6 | 分子量 | 578.67 |
| 溶解度 | DMSO : 100 mg/mL (172.81 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.7281 mL | 8.6405 mL | 17.281 mL |
| 5 mM | 345.6 μL | 1.7281 mL | 3.4562 mL |
| 10 mM | 172.8 μL | 864.1 μL | 1.7281 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
















