Fluorescein Tyramide是一种绿色荧光标记试剂（λabs: 494nm; λem: 517nm）。
Cas No.:210236-90-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Fluorescein Tyramide is a green fluorescent labeling reagent (λabs: 494nm; λem: 517nm). Under the catalysis of horseradish peroxidase (HRP), Fluorescein Tyramide enables in situ signal deposition via tyramide signal amplification (TSA) technology, enhancing detection sensitivity by 10–100 times, making Fluorescein Tyramide suitable for low-abundance target detection. Fluorescein Tyramide can be used in related research such as immunohistochemistry (IHC), fluorescence in situ hybridization (FISH), and flow cytometry (FCM)[1-2].
References:
[1] Hopman AH, Ramaekers FC, Speel EJ. Rapid synthesis of biotin-, digoxigenin-, trinitrophenyl-, and fluorochrome-labeled tyramides and their application for In situ hybridization using CARD amplification. J Histochem Cytochem. 1998 Jun;46(6):771-7.
[2] van Gijlswijk RP, Zijlmans HJ, Wiegant J, et al. Fluorochrome-labeled tyramides: use in immunocytochemistry and fluorescence in situ hybridization. J Histochem Cytochem. 1997 Mar;45(3):375-82.
Fluorescein Tyramide是一种绿色荧光标记试剂（λabs: 494nm; λem: 517nm）。Fluorescein Tyramide可在辣根过氧化物酶（HRP）催化下通过酪胺信号放大（TSA）技术实现信号原位沉积，使检测灵敏度提升10-100倍，适用于低丰度靶标检测。Fluorescein Tyramide可用于免疫组化（IHC）、原位杂交（FISH）和流式细胞术（FCM）等相关研究[1-2]。
Fluorescein Tyramide的EMARS标记方法[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1.细胞准备：使用表达辣根过氧化物酶（HRP）融合蛋白的细胞系（如HeLa S3-TetON/HRP-DAFGPI或HRP-Thy1GPI），通过质粒转染或诱导表达（如添加1μg/mL多西环素）使HRP定位于目标区域（细胞膜、内质网或高尔基体）。
2.EMARS标记反应：将细胞与Fluorescein Tyramide（0.1mM）共同孵育，37°C避光反应30分钟。加入1mM H₂O₂激活反应，作用5分钟。反应结束后，用PBS（含10mM叠氮化钠）清洗细胞2次，终止反应。
3. 样品处理与检测：细胞裂解后，通过差速离心获得膜组分（20,000g，15分钟）。用NP-40裂解缓冲液溶解蛋白，进行SDS-PAGE电泳（10%凝胶）。直接使用荧光成像系统（如LAS-4000）在蓝色激发光下检测Fluorescein Tyramide标记信号（激发/发射波长：494nm/517nm）。
注意事项：
（1）Fluorescein Tyramide标记效率显著高于传统荧光素芳基叠氮（FA），且非特异性反应低。
（2）H₂O₂处理时间需严格控制（≤5分钟），以避免细胞毒性。
（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Miyagawa-Yamaguchi A, Kotani N, Honke K. Each GPI-anchored protein species forms a specific lipid raft depending on its GPI attachment signal. Glycoconj J. 2015 Oct;32(7):531-40.
| Cas No. | 210236-90-1 | SDF | |
| 别名 | 荧光素酪胺 | ||
| Canonical SMILES | OC1=CC2=C(C3(C4=CC=C(C=C4O2)O)C5=CC=C(C=C5C(O3)=O)C(NCCC6=CC=C(C=C6)O)=O)C=C1 | ||
| 分子式 | C29H21NO7 | 分子量 | 495.48 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0182 mL | 10.0912 mL | 20.1824 mL |
| 5 mM | 403.6 μL | 2.0182 mL | 4.0365 mL |
| 10 mM | 201.8 μL | 1.0091 mL | 2.0182 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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