Lucigenin (NSC-151912)是一种化学发光探针，用于检测生物系统中内源性产生的超氧阴离子自由基（O₂⁻），Lucigenin在细胞内被单电子还原后，可与超氧阴离子反应并产生可测量的化学发光，其荧光波长为Ex/Em=455/505nm。
Cas No.:2315-97-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Lucigenin (NSC-151912) is a chemiluminescent probe used to detect endogenously produced superoxide anion radicals (O₂⁻) in biological systems. After being reduced by a single electron within the cell, lucigenin reacts with superoxide anions to produce measurable chemiluminescence, with excitation/emission wavelengths of Ex/Em=455/505nm[1]. Lucigenin can be used to measure intracellular oxidative stress levels and to study physiological and pathological processes associated with superoxide anions[2].
References:
[1] Faulkner K, Fridovich I. Luminol and lucigenin as detectors for O2.-. Free Radic Biol Med. 1993 Oct;15(4):447-51.
[2] Abdussalam A, Chen Y, Yuan F, et al. Dithiothreitol-Lucigenin Chemiluminescent System for Ultrasensitive Dithiothreitol and Superoxide Dismutase Detection. Anal Chem. 2022 Aug 9;94(31):11023-11029.
Lucigenin (NSC-151912)是一种化学发光探针，用于检测生物系统中内源性产生的超氧阴离子自由基（O₂⁻），Lucigenin在细胞内被单电子还原后，可与超氧阴离子反应并产生可测量的化学发光，其荧光波长为Ex/Em=455/505nm[1]。Lucigenin可用于检测细胞内的氧化应激水平，以及研究与超氧阴离子相关的生理和病理过程[2]。
使用Lucigenin测定活细胞氧化应激水平
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1. 制备染色液
(1) 配置储存液：使用DMSO溶解Lucigenin，配置浓度为10mM的储存液。
注意：未使用的储存液分装后应在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
(2) 配置工作液：用合适的缓冲液（如：无血清细胞培养基或PBS）稀释储存液，配制浓度为5-10μM的工作液。
注意：请根据实际情况调整工作液浓度，建议现用现配。
2. 细胞悬浮染色
（1）悬浮细胞：在4°C下，以1000g离心3-5分钟，弃去上清液，用PBS清洗两次，每次5分钟。
（2）贴壁细胞：弃去细胞培养基，加入胰蛋白酶消化细胞以获得单细胞悬液。消化完成后，在4°C下以1000g离心3-5分钟，弃去上清液。用PBS清洗两次，每次5分钟。
（3）加入Lucigenin工作溶液重悬细胞，室温避光孵育15分钟。
（4）孵育结束后，在4°C下以400 g离心3-4分钟，去除上清液，加入PBS清洗2次，每次5分钟。
（5）用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞，通过荧光显微镜或流式细胞术进行检测，荧光最大吸收/发射波长为Ex/Em=455/505nm。
3. 细胞贴壁染色
（1）在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
（2）移去细胞培养基，用预温的PBS轻轻清洗细胞一次。
（3）加入适量的Lucigenin工作液，使其能覆盖所有细胞。
（4）室温避光孵育15分钟。
（5）孵育结束后，吸弃染料工作液，使用预温的PBS清洗盖玻片2~3次。
（6）可加入少量新鲜的无血清培养基或PBS覆盖细胞，立即进行检测。
（7）显微镜检测：Lucigenin检测超氧阴离子的化学发光信号，其荧光最大吸收/发射波长为Ex/Em=455/505nm。
注意事项：
（1）Lucigenin作为化学发光探针，其信号强度与超氧阴离子的产生速率和浓度直接相关。实验需设置严格的阴性和阳性对照。
（2）孵育和检测过程应注意避光操作，以减缓可能的荧光淬灭并降低背景。
（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Li Y, Zhu H, Kuppusamy P, et al. Validation of lucigenin (bis-N-methylacridinium) as a chemilumigenic probe for detecting superoxide anion radical production by enzymatic and cellular systems. J Biol Chem. 1998 Jan 23;273(4):2015-23.
| Cas No. | 2315-97-1 | SDF | |
| 别名 | 光泽精; NSC-151912; L-6868 | ||
| Canonical SMILES | C[N+]1=C2C=CC=CC2=C(C3=C4C=CC=CC4=[N+](C)C5=C3C=CC=C5)C6=C1C=CC=C6.O=N([O-])=O.O=N([O-])=O | ||
| 分子式 | C28H22N4O6 | 分子量 | 510.5 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 25 mg/mL (48.97 mM) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.9589 mL | 9.7943 mL | 19.5886 mL |
| 5 mM | 391.8 μL | 1.9589 mL | 3.9177 mL |
| 10 mM | 195.9 μL | 979.4 μL | 1.9589 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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