GPDA (GPN)
(Synonyms: N-苷氨酰-脯氨酰对硝基苯胺-对甲苯磺酸盐,GPN; Glycylproline p-nitroanilide tosylate) 目录号 : GC30321
GPDA (GPN)是甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(Glycylproline Dipeptidyl Aminopeptidase)检测的底物。
Cas No.:65096-46-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
GPDA (GPN) is the substrate for detecting glycylproline dipeptidyl aminopeptidase. GPDA (GPN) can be hydrolyzed by the corresponding enzyme, producing yellow p-nitroaniline. By monitoring the change in absorbance at 405nm, enzyme activity can be quantified[1].
References:
[1] Hino M, Fuyamada H, Hayakawa T, et al. X-Prolyl dipeptidyl-aminopeptidase activity, with X-proline p-nitroanilides as substrates, in normal and pathological human sera. Clin Chem. 1976 Aug;22(8):1256-61.
GPDA(GPN)是甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(Glycylproline Dipeptidyl Aminopeptidase)检测的底物。GPDA(GPN)可作为底物被相应的酶水解,生成黄色的对硝基苯胺,通过监测405nm波长下的吸光度变化,即可定量酶活性[1]。
GPDA酶活性测定
本实验方案根据研究内容整理,仅供参考,请根据实际需求进行调整。
1. 试剂准备:将GPDA溶解于157.5mM Tris-HCl缓冲液(pH=7.9),配制成高浓度储备液(5mM),分装后于-20°C保存。将甘氨酰甘氨酸溶解于Tris-HCl缓冲液(157.5mM pH=7.9)制成62.6mM。
2. 酶样品制备:使用人肝组织、肝癌组织或胚胎组织的匀浆液,或血清样本。组织匀浆时按1:9(w/v)比例加入0.25M蔗糖溶液。
3. GPDA酶活性检测:50μL酶样品 + 1mL反应液(含1.7mM GPDA底物及62.6mM甘氨酰甘氨酸)。37°C孵育30分钟,加入5mL 1M乙酸缓冲液(pH=4.2)终止反应。使用分光光度计在405nm波长下检测释放的对硝基苯胺(p-nitroaniline)吸光度。
注意事项:
(1)底物对光敏感,需避光保存及操作,以减缓降解。
(2)组织样本的死后变化可能影响酶活性(尤其GPDA在微粒体中的稳定性较差),建议使用手术新鲜样本而非尸检样本。
(3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Kojima J, Ueno Y, Kasugai H, et al. Glycylproline dipeptidyl aminopeptidase and gamma-glutamyl transpeptidase in human hepatic cancer and embryonal tissues. Clin Chim Acta. 1987 Aug 31;167(3):285-91.
| Cas No. | 65096-46-0 | SDF | |
| 别名 | N-苷氨酰-脯氨酰对硝基苯胺-对甲苯磺酸盐,GPN; Glycylproline p-nitroanilide tosylate | ||
| Canonical SMILES | O=C([C@H](CCC1)N1C(CN)=O)NC2=CC=C([N+]([O-])=O)C=C2.O=S(C3=CC=C(C)C=C3)(O)=O | ||
| 分子式 | C20H24N4O7S | 分子量 | 464.49 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 48 mg/mL (103.34 mM) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1529 mL | 10.7645 mL | 21.529 mL |
| 5 mM | 430.6 μL | 2.1529 mL | 4.3058 mL |
| 10 mM | 215.3 μL | 1.0764 mL | 2.1529 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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