Coumarin 6是一种稳定的激光染料（λex=450nm, λem=500nm），是多种化学和物理化学研究中的有用探针。
Cas No.:38215-36-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Coumarin 6 is a stable laser dye (λex=450nm, λem=500nm) and is a useful probe in variety of chemical and physicochemical studies[1]. Coumarin 6 is used as a fluorescent dye for microplastics, is soluble in organic solvents but insoluble in water, Coumarin 6 emits intense green fluorescence when exposed to blue light[2]. Due to the extremely low solubility (with a solubility in water lower than 0.25μg/ml), Coumarin 6 can be regarded as a typical hydrophobic model drug[3]. Coumarin 6 can be encapsulated in single-chain liposomes and administered by eye drops, which is used for retinal flat imaging in animal models[4]. Coumarin 6 can form a complex with β-cyclodextrin, which can be used to quickly distinguish different types of cells[5].
References:
[1] Satpati A K, Kumbhakar M, Maity D K, et al. Photophysical investigations of the solvent polarity effect on the properties of coumarin-6 dye[J]. Chemical physics letters, 2005, 407(1-3): 114-118.
[2] Cheng Y, Zhang J, Nakano H, et al. Coumarin 6 staining method to detect microplastics[J]. Marine Pollution Bulletin, 2023, 193: 115167.
[3] Miao X, Li Y, Wang X, et al. Transport mechanism of coumarin 6 nanocrystals with two particle sizes in MDCKII monolayer and larval zebrafish[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2016, 8(20): 12620-12630.
[4] Inokuchi Y, Hironaka K, Fujisawa T, et al. Physicochemical properties affecting retinal drug/coumarin-6 delivery from nanocarrier systems via eyedrop administration[J]. Investigative ophthalmology & visual science, 2010, 51(6): 3162-3170.
[5] Edetsberger M, Knapp M, Gaubitzer E, et al. Effective staining of tumor cells by coumarin-6 depends on the stoichiometry of cyclodextrin complex formation[J]. Journal of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry, 2011, 70(3): 327-331.
Coumarin 6是一种稳定的激光染料（λex=450nm, λem=500nm），是多种化学和物理化学研究中的有用探针[1]。Coumarin 6被用作微塑料的荧光标记物，可溶于有机溶剂但不溶于水，在蓝光照射下会发出强烈的绿色荧光[2]。由于极低的水溶性（低于0.25μg/ml），Coumarin 6可被视为典型的疏水性模型药物[3]。Coumarin 6可被包裹在单链脂质体中并通过滴眼剂给药，用于动物模型的视网膜平面成像[4]。Coumarin 6能与β-环糊精形成复合物，可用于快速区分不同类型的细胞[5]。
用Coumarin 6对肿瘤细胞进行染色
此方案仅提供一个指导原则，应根据您的具体需求进行修改
1. 用于细胞染色的Coumarin 6溶液的配制
（1）通过将Coumarin 6粉末溶解在无水乙醇中制备60μM的Coumarin 6储备溶液（清澈的绿色荧光溶液）。将Coumarin 6储备溶液（60μM）用无水乙醇稀释至最终浓度为1μM的工作溶液。
注意：工作溶液必须在实验当天新鲜配制。
（2）Coumarin 6与β-环糊精的复合形成
将乙醇溶液形式的Coumarin 6（工作溶液）和水溶液形式的β-环糊精以不同比例混合，以获得所需的染料/β-环糊精浓度比。将该混合物在室温下搅拌10分钟，此过程在β-环糊精浓度超过20μM的情况下会得到一种清澈、高度绿色荧光的溶液。用于染色细胞，将此溶液加入正在生长的缓冲液中，最终染料浓度为30nM。
2.细胞染色和显微荧光图像
（1）将膀胱癌细胞置于带盖载玻片中，在MEM培养基中于37°C和5% CO2条件下培养。
（2）在成像过程中，将培养基替换为含有浓度为30nM的Coumarin 6/β-环糊精复合物的磷酸盐缓冲盐水（137mM NaCl、2.7mM KCl、10mM Na2HPO4、1.76mM KH2PO4，pH 7.4）。
（3）在孵育10分钟后拍摄显微荧光图像，采用适当的滤光片设置和10倍放大倍数。
3. 实验注意事项
（1）在整个实验过程中，Coumarin 6溶液应存放在黑暗处。
（2）本实验方案及所有试剂仅用于科学研究用途。
References:
[1] Edetsberger M, Knapp M, Gaubitzer E, et al. Effective staining of tumor cells by coumarin-6 depends on the stoichiometry of cyclodextrin complex formation[J]. Journal of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry, 2011, 70(3): 327-331.
| Cas No. | 38215-36-0 | SDF | |
| 别名 | 香豆素 6 | ||
| Canonical SMILES | O=C1C(C2=NC3=CC=CC=C3S2)=CC4=CC=C(N(CC)CC)C=C4O1 | ||
| 分子式 | C20H18N2O2S | 分子量 | 350.43 |
| 溶解度 | DMSO: 5 mg/mL (14.27 mM) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.8536 mL | 14.2682 mL | 28.5364 mL |
| 5 mM | 570.7 μL | 2.8536 mL | 5.7073 mL |
| 10 mM | 285.4 μL | 1.4268 mL | 2.8536 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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