Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC也称为pERTKR-AMC，是一种含有AMC（7-氨基-4-甲基香豆素）的五肽荧光底物。
Cas No.:155575-02-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC also called pERTKR-AMC, is a pentapeptide fluorescent substrate containing AMC (7-amino-4-methylcoumarin). Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC can be efficiently cleaved by furin protease, and is therefore often used as a substrate for measuring furinase activity [1].
References:
[1] Neugebauer WA, Parent A, Yuan XW, Day R. C-terminal amidation on aryl hydrazine resin. Adv Exp Med Biol. 2009;611:371-372.
Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC也称为pERTKR-AMC，是一种含有AMC（7-氨基-4-甲基香豆素）的五肽荧光底物。Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC可被furin酶高效切割，因此常被作为测定furin酶活性时的底物[1]。
furin酶活性检测[1-3]
本方案来自文献，请根据您的具体需求修改。
1.制备底物工作液
（1）配置储存液：使用DMSO溶解Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC配置储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20°C或-80°C避光保存，避免反复冻融。
（2）配置工作液:使用反应缓冲液（含有0.2% Triton X-100, 2mM CaCl2, 0.02% sodium azide和1mg/ml BSA的100mM的HEPES缓冲液）稀释储存液。
注意：工作液现配现用，4 ℃或冰上短暂保存。
2.制备furin酶工作液：用反应缓冲液稀释furin酶。
3.准备一个96孔板。
空白孔:加入Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC底物，浓度为10-20μM。
反应孔:加入Pyr-Arg-Thr-Lys-Arg-AMC底物与furin酶混合液，浓度分别为10-20μM和10-20nM。
抑制剂对照孔（验证特异性，可选）：furin酶与抑制剂混合液。
4. 96孔板37℃预孵育30min。
6.荧光分光光度计测量350-360nm激发下440-460nm处的荧光强度。
注意事项：
1）荧光底物存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Braun E, Hotter D, Koepke L, et al. Guanylate-Binding Proteins 2 and 5 Exert Broad Antiviral Activity by Inhibiting Furin-Mediated Processing of Viral Envelope Proteins. Cell Rep. 2019;27(7):2092-2104.e10.
[2] Shiryaev SA, Farhy C, Pinto A, et al. Characterization of the Zika virus two-component NS2B-NS3 protease and structure-assisted identification of allosteric small-molecule antagonists. Antiviral Res. 2017;143:218-229.
[3] Ma XR, Alugubelli YR, Ma Y, et al. MPI8 is Potent against SARS-CoV-2 by Inhibiting Dually and Selectively the SARS-CoV-2 Main Protease and the Host Cathepsin L. ChemMedChem. 2022;17(1):e202100456.
| Cas No. | 155575-02-3 | SDF | |
| 分子式 | C37H57N13O9 | 分子量 | 827.94 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.2078 mL | 6.0391 mL | 12.0782 mL |
| 5 mM | 241.6 μL | 1.2078 mL | 2.4156 mL |
| 10 mM | 120.8 μL | 603.9 μL | 1.2078 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.00% Appearance: A solid
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- SDS (Safety Data Sheet)
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