Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA是一种显色的多肽底物，Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA可被鲎凝血酶特异性水解，释放出对硝基苯胺（pNA）以产生颜色变化。
Cas No.:68223-95-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA is a chromogenic peptide substrate. Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA can be specifically hydrolyzed by the limulus clotting enzyme, releasing p-nitroaniline (pNA) to produce a color change. Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA can be used for quantitative detection of endotoxins and in research related to limulus amebocyte lysate (LAL) reagents[1-3].
References:
[1] Bahgat M, Aboul-Enein MN, El Azzouny AA, et al. A cyclohexanecarboxamide derivative with inhibitory effects on Schistosoma mansoni cercarial serine protease and penetration of mice skin by the parasite. Acta Pol Pharm. 2009 May-Jun;66(3):333-40.
[2] Bahgat M, Khalifa N. Differential inhibitory effect of newly synthesized pyridine-2-one derivatives on the cercarial serine protease activity of the parasite Schistosoma mansoni. Acta Pol Pharm. 2006 May-Jun;63(3):181-8.
[3] Iwanaga S, Morita T, Harada T, et al. Chromogenic substrates for horseshoe crab clotting enzyme. Its application for the assay of bacterial endotoxins. Haemostasis. 1978;7(2-3):183-8.
Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA是一种显色的多肽底物，Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA可被鲎凝血酶特异性水解，释放出对硝基苯胺（pNA）以产生颜色变化。Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA可用于内毒素定量检测和鲎试剂相关研究[1-3]。
Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA测定细菌内毒素的方法[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1.试剂准备：将合成底物Boc-Val-Leu-Gly-Arg-pNA溶解于无热原蒸馏水中，稀释至工作浓度（0.1mM或0.5mM）；配制0.1M Tris-HCl 缓冲液（pH=8.0）；配制0.5M的MgCl₂溶液；将标准内毒素（大肠杆菌0111-B4脂多糖）溶解于无热原生理盐水中，配制成所需浓度的溶液（如0.1%）；准备鲎（Tachypleus或Limulus）血细胞裂解液。
2.样品预处理：待测样品（如细菌内毒素溶液）需使用无菌、无热原的玻璃器皿和试剂进行准备与稀释。
3.内毒素的检测：在反应体系中依次加入0.8ml溶解于Tris-HCl缓冲液（pH=8.0）中的底物工作液、50μl 0.5M MgCl₂溶液以及20μl内毒素样品溶液，于37°C预孵育3分钟。随后，加入20-50μl的鲎血细胞裂解液启动反应，继续在37°C孵育15分钟（或根据需要延长至30、60、240分钟）。孵育结束后，加入100μl冰醋酸以终止反应。使用分光光度计在405nm波长下测量反应释放出的对硝基苯胺（pNA）的吸光度值，该值与内毒素浓度成正比。
注意事项：
（1）为确保结果准确，整个实验过程需使用无菌、无热原的器皿和溶液。部分底物需用有机溶剂助溶，请注意操作安全。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Iwanaga S, Morita T, Harada T, et al. Chromogenic substrates for horseshoe crab clotting enzyme. Its application for the assay of bacterial endotoxins. Haemostasis. 1978;7(2-3):183-8.
| Cas No. | 68223-95-0 | SDF | |
| 分子式 | C30H49N9O8 | 分子量 | 663.78 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5065 mL | 7.5326 mL | 15.0652 mL |
| 5 mM | 301.3 μL | 1.5065 mL | 3.013 mL |
| 10 mM | 150.7 μL | 753.3 μL | 1.5065 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- SDS (Safety Data Sheet)
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