DBCO-NHS ester

目录号: GC39241纯度: >98.00%同义词: 二苯并环辛炔-N-羟基琥珀酰亚氨基基酯
DBCO-NHS ester是一种交联剂,用于将DBCO基团共价连接到含胺分子上。

DBCO-NHS ester
Cas No.: 1353016-71-3
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1
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1
50mg¥1,120.00现货
1
100mg¥1,890.00现货
1

文献被引

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  • Nature cover
    Nature
    641, 529–536 (2025)
  • Nature cover
    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
  • Cell cover
    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

DBCO-NHS ester is a crosslinker used to covalently attach DBCO groups to amine-containing molecules [1]. DBCO-NHS ester is commonly used for bioorthogonal labeling and molecular coupling in copper-free click chemistry [2-3].

References:
[1]. Hu B, Ji C, Zhou Z, et al. Bioorthogonal reaction-mediated photosensitizer–peptide conjugate anchoring on cell membranes for enhanced photodynamic therapy. Biomaterials Science. 2025.
[2]. Tan A, Liu Q, Septiadi D, et al. Understanding selectivity of metabolic labelling and click-targeting in multicellular environments as a route to tissue selective drug delivery. Journal of Materials Chemistry B. 2021 Jul 7; 9(26): 5365-5373.
[3]. Wiener J, Kokotek D, Rosowski S, et al. Preparation of single-and double-oligonucleotide antibody conjugates and their application for protein analytics. Scientific reports. 2020 Jan 29; 10(1): 1457.

DBCO-NHS ester是一种交联剂,用于将DBCO基团共价连接到含胺分子上 [1]。DBCO-NHS ester常用于无铜点击化学中的生物正交标记和分子偶联 [2-3]

实验参考方法 Experimental Reference Method

本方案描述了DBCO-NHS ester修饰的蛋白质与叠氮化物染料的无铜点击反应。实际应用条件可能需要根据研究设计进行优化 [1-2]

1. 试剂和材料准备

DBCO-NHS ester、目标蛋白质、叠氮化物修饰的荧光染料、PBS、碳酸盐缓冲液。

2. 实验步骤

(1)蛋白质的DBCO修饰

将目标蛋白质溶于pH 8.5的碳酸盐缓冲液中,浓度≥1mg/mL。将DBCO-NHS ester溶于无水DMSO(控制DMSO在标记液中的终浓度≤10%),并以DBCO:蛋白质比例5-20:1加入蛋白质溶液中。涡旋混合,室温避光孵育2小时(或4℃过夜)。用预冷的PBS(pH 7.4)平衡脱盐柱,将反应液上样至柱上,离心收集纯化的蛋白质。测定蛋白浓度,分装后-80℃冷冻保存。

(2)DBCO-叠氮化物点击反应

将叠氮化物染料(例如Azide-Cy5)用DMSO配制成1-10mM的原液,避光保存。将DBCO修饰的蛋白与叠氮化物染料以1:1.5-3(摩尔比)的比例溶于PBS(pH 7.4)中混合。涡旋混合,室温避光反应1-4小时(或4℃避光反应过夜)。使用脱盐柱或透析(PBS,4℃避光)去除游离染料。进行SDS-PAGE(荧光扫描)或紫外-可见光谱分析(计算染料/蛋白比,DOL)。

注意事项

(1)无水操作:DBCO-NHS ester易水解,需在干燥环境中溶解(用氮气吹扫过的DMSO进行溶解)。

(2)摩尔比优化:过高的DBCO比例可能导致蛋白聚集,建议先测试5:1、10:1、15:1梯度。

(3)避光低温:DBCO和荧光染料均对光敏感,因此整个过程应避光;纯化在4℃下进行。

(4)避免干扰:避免反应体系被含有硫醇(例如DTT、β-巯基乙醇)或叠氮化物的缓冲液污染。

(5)细胞实验验证:若用于活细胞标记,需验证修饰蛋白的生物活性及叠氮化物染料的细胞通透性。

References:

[1]. Ciferri MC, Bruno S, Rosenwasser N, et al. Standardized method to Functionalize plasma-extracellular vesicles via copper-free click Chemistry for targeted drug delivery strategies. ACS Applied Bio Materials. 2024 Jan 16; 7(2): 827-838.

[2]. Lee HJ, Fernandes-Cunha GM, Putra I, et al. Tethering growth factors to collagen surfaces using copper-free click chemistry: surface characterization and in vitro biological response. ACS applied materials & interfaces. 2017 Jul 19; 9(28): 23389-23399.

产品文档 Product Documents

Purity:>98.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
1353016-71-3
同义词
二苯并环辛炔-N-羟基琥珀酰亚氨基基酯
SMILES
O=C(N1CC2=CC=CC=C2C#CC3=CC=CC=C31)CCC(ON4C(CCC4=O)=O)=O
分子式
C23H18N2O5
分子量
402.4 g/mol
溶解性
DMSO: 100 mg/mL (248.51 mM)
保存条件
Store at -20°C
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
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计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol