Cyanine 5 Tyramide是一种基于Cyanine5荧光染料与酪胺(tyramide)化学结合而成的荧光信号放大试剂(ex/em=645/670nm)。
Cas No.:1431148-26-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Cyanine 5 Tyramide is a fluorescent signal amplification reagent formed by the chemical conjugation of the Cyanine5 fluorophore with tyramine (ex/em=645/670nm). In the presence of horseradish peroxidase (HRP) catalysis, the tyramine moiety of Cyanine 5 Tyramide is oxidized to generate highly reactive radicals, which covalently bind to tyrosine residues of proteins near the target site, thereby achieving significant signal amplification. Cyanine 5 Tyramide is used in bioimaging research such as immunohistochemistry (IHC), immunofluorescence (IF), and fluorescence in situ hybridization (FISH)[1].
References:
[1] Huang X, Wang J, Liu H, et al. Quantum dot-based FRET for sensitive determination of hydrogen peroxide and glucose using tyramide reaction. Talanta. 2013 Mar 15;106:79-84.
Cyanine 5 Tyramide是一种基于Cyanine5荧光染料与酪胺(tyramide)化学结合而成的荧光信号放大试剂(ex/em=645/670nm)。Cyanine 5 Tyramide在辣根过氧化物酶(HRP)催化下,其酪胺部分被氧化生成高活性自由基,与靶标附近蛋白质的酪氨酸残基共价结合,从而实现信号的高度放大。Cyanine 5 Tyramide可用于免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)、荧光原位杂交(FISH)等生物成像研究[1]。
Cyanine 5 Tyramide检测过氧化氢和葡萄糖中的应用方法[1]
本实验方案根据研究内容整理,仅供参考,请根据实际需求进行调整。
1. 试剂准备:Cyanine 5 Tyramide(900nM);辣根过氧化物酶(HRP,Sigma-Aldrich);1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)用于偶联;葡萄糖氧化酶(GOx,BBI);Tris缓冲液(100mM,pH=7.5);过氧化氢(H₂O₂)标准溶液;葡萄糖标准溶液;牛血清白蛋白(BSA)用于封闭。
2. QD-HRP偶联物制备:将24pmol 605nm QDs与480pmol HRP(摩尔比1:20)在30μL磷酸盐缓冲液(20mM,pH=6.0)中混合,加入48nmol EDC和48nmol NHS,室温孵育2小时。然后加入BSA至终浓度1mg/mL,继续孵育1小时以封闭。使用超滤膜(100kDa截留分子量)纯化QD-HRP偶联物,最终产物保存于硼酸盐缓冲液(4°C)。通过毛细管电泳(CE)表征偶联物。
3. 过氧化氢检测:反应体系包含20nM QD-HRP偶联物、900nM Cyanine 5 Tyramide,置于100mM Tris缓冲液(pH=7.5)中。向180μL反应液中加入20μL不同浓度的H₂O₂溶液(0-4.0μM),室温孵育10分钟。使用荧光光谱仪测量荧光光谱,激发波长488nm,记录605nm(QDs发射)和670nm(Cy5发射)处的荧光强度。Cy5荧光强度与H₂O₂浓度在10-100nM范围内呈线性关系,检测限为10nM。
4. 葡萄糖检测:反应体系包含20nM QD-HRP偶联物、900nM Cyanine 5 Tyramide、5U/mL葡萄糖氧化酶,置于100mM Tris缓冲液(pH=7.5)中。向180μL反应液中加入20μL不同浓度的葡萄糖溶液(0-20.0μM),37°C孵育5分钟。测量荧光光谱,Cy5荧光强度与葡萄糖浓度在50-500nM范围内呈线性关系,检测限为50nM。
(1)反应时间10分钟足以完成,孵育后需及时检测。
(2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Huang X, Wang J, Liu H, et al. Quantum dot-based FRET for sensitive determination of hydrogen peroxide and glucose using tyramide reaction. Talanta. 2013 Mar 15;106:79-84.
| Cas No. | 1431148-26-3 | SDF | |
| 别名 | 氰基-5-酪酰胺,CYANINE5TYRAMIDE,Tyramide-Cy5 | ||
| Canonical SMILES | CC[N+]1=C(C(C)(C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C12)C)/C=C/C=C/C=C3N(C4=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C4C/3(C)C)CCCCCC(NCCC5=CC=C(C=C5)O)=O | ||
| 分子式 | C41H49N3O8S2 | 分子量 | 775.97 |
| 溶解度 | DMSO : 62.5 mg/mL (80.54 mM; Need ultrasonic and warming) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
![]() |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.2887 mL | 6.4435 mL | 12.8871 mL |
| 5 mM | 257.7 μL | 1.2887 mL | 2.5774 mL |
| 10 mM | 128.9 μL | 644.4 μL | 1.2887 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- SDS (Safety Data Sheet)
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