CY5-N3

目录号: GC30247纯度: >95.00%同义词: Sulfo-Cyanine5-azide
CY5-N3是一种结合了Cyanine5荧光染料与叠氮基团的功能性荧光探针(ex/em=646/662nm)。

CY5-N3
Cas No.: 1621101-43-6
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    Nature
    641, 529–536 (2025)
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    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
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    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
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    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
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    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
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    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

CY5-N3 is a functional fluorescent probe that combines the Cyanine5 dye with an azido group (ex/em=646/662nm). CY5-N3 can specifically and covalently link to alkyne-bearing compounds via a click chemistry reaction, enabling efficient fluorescent labeling of biomolecules. CY5-N3 is used in biological imaging, molecular labeling and tracking, drug screening and development, and related fields[1-4].

References:
[1] Palsuledesai CC, Ochocki JD, Markowski TW, et al. A combination of metabolic labeling and 2D-DIGE analysis in response to a farnesyltransferase inhibitor facilitates the discovery of new prenylated proteins. Mol Biosyst. 2014 May;10(5):1094-103.
[2] Gao Z, Zhang E, Zhao H, et al. Bacteria-Mediated Intracellular Click Reaction for Drug Enrichment and Selective Apoptosis of Drug-Resistant Tumor Cells. ACS Appl Mater Interfaces. 2022 Mar 16;14(10):12106-12115.
[3] Sundin C, Zetterström CE, Vo DD, et al. Exploring resveratrol dimers as virulence blocking agents - Attenuation of type III secretion in Yersinia pseudotuberculosis and Pseudomonas aeruginosa. Sci Rep. 2020 Feb 7;10(1):2103.
[4] Lam YY, Tan A, Nowell CJ, et al. Systematic Investigation of Metabolic Oligosaccharide Engineering Efficiency in Intestinal Cells Using a Dibenzocyclooctyne-Monosaccharide Conjugate. Chembiochem. 2023 Jun 15;24(12):e202300144.

CY5-N3是一种结合了Cyanine5荧光染料与叠氮基团的功能性荧光探针(ex/em=646/662nm)。CY5-N3可通过点击化学反应与炔基化合物特异性共价连接,实现生物分子的高效荧光标记。CY5-N3可用于生物成像、分子标记与追踪以及药物筛选与研发等领域[1-4]

实验参考方法 Experimental Reference Method

基于活细胞的靶蛋白CY5-N3荧光标记与成像[1]

本实验方案根据研究内容整理,仅供参考,请根据实际需求进行调整。

1.探针孵育:将设计合成的小分子光亲和探针用DMSO配制成储备液。在细胞成像实验中,将HeLa细胞与探针(工作浓度通常为2μM)在37°C、5% CO₂条件下,于DMEM完全培养基中孵育2小时。孵育过程中,培养基中DMSO的终浓度不应超过1%。

2. 光交联与细胞固定:孵育结束后,吸弃培养基,用DMEM和PBS各洗涤细胞两次,以去除未结合的过量探针。将细胞置于冰上,用波长为365nm的UV光照射15-20分钟,使探针上的光反应基团(如脂肪族重氮啶)激活,并与靶蛋白形成共价交联。随后,用含3.7%多聚甲醛的DMEM在室温下固定细胞30分钟。

3.细胞透化与封闭:弃去固定液,用PBS洗涤细胞两次。用含0.1% Triton X-100的PBS溶液室温处理细胞10分钟,以增加细胞膜通透性。透化后,用PBS洗涤两次,再用含2% BSA和0.05% Tween-20的PBS溶液在室温下封闭30分钟,以降低非特异性结合。

4.点击化学标记:弃去封闭液,用PBS(含0.05% Tween-20)洗涤细胞两次。在细胞上加入新鲜配制的点击化学反应液,其最终组成为:CY5-N3(5μM)、TBTA(20μM)、TCEP(200μM)和CuSO₄(200μM),溶于PBS中,总体积为100μL。在室温下避光反应2小时。此铜催化的叠氮-炔环加成反应(CuAAC)将荧光染料CY5共价连接到已与靶蛋白交联的探针炔基上。

5.洗涤与核染色:反应结束后,依次用含0.05% Tween-20和0.5mM EDTA的PBS洗涤3次(每次10分钟),再用PBS洗涤2次(每次5分钟)。为标记细胞核,用含0.25mg/mL Hoechst 33258的PBS溶液室温避光孵育15分钟。最后,用PBS和去离子水各洗涤一次,即可进行封片和成像。

6.图像采集:使用共聚焦显微镜(如Zeiss LSM 510 Meta或Leica TCS SP5X系统)在相应的激发/发射波长下采集CY5(ex/em=646/662nm)通道的荧光图像。

注意事项:

(1)CY5-N3试剂对光敏感,操作时需避光。

(2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

References:

[1] Su Y, Pan S, Li Z, et al. Multiplex imaging and cellular target identification of kinase inhibitors via an affinity-based proteome profiling approach. Sci Rep. 2015 Jan 12;5:7724.

产品文档 Product Documents

Purity:>95.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
1621101-43-6
同义词
Sulfo-Cyanine5-azide
SMILES
CC1(C)/C(N(C2=CC=C(S(=O)(O)=O)C=C21)CCCCCC(NCCCN=[N+]=[N-])=O)=C\C=C\C=C\C(C(C)(C3=CC(S(=O)([O-])=O)=CC=C43)C)=[N+]4CC
分子式
C36H46N6O7S2
分子量
738.92 g/mol
溶解性
DMSO : 25 mg/mL (33.83 mM)
保存条件
Store at -20°C, protect from light
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备 RT,或根据请求配备蓝冰。

计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol