BODIPY-C12 Ceramide (d18:1/12:0)
(Synonyms: BODIPY-C12 Ceramide, BODIPY-Ceramide (d18:1/12:0), BODIPY-Cer(d18:1/12:0), BODIPY-N-Lauroyl-D-erythro-Sphingosine, B12Cer) 目录号 : GC42963
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BODIPY-C12 Ceramide (d18:1/12:0)是一种荧光标记的C12神经酰胺。
Cas No.:1246355-58-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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BODIPY-C12 Ceramide (d18:1/12:0) is a fluorescently labeled C12 ceramide. BODIPY-C12 Ceramide is a lipid molecule with BODIPY fluorescent dye attached to one fatty chain. Its excitation/emission maximum values are 505/540 nm. BODIPY C12-Ceramide is commonly used in cell membrane lipid metabolism, Golgi labeling, and lipid transport studies[1].
References:
[1]He X, et al. A fluorescence-based, high-performance liquid chromatographic assay to determine acid sphingomyelinase activity and diagnose types A and B Niemann-Pick disease. Anal Biochem. 2003 Mar 1;314(1):116-20.
BODIPY-C12 Ceramide (d18:1/12:0)是一种荧光标记的C12神经酰胺。BODIPY- C12神经酰胺是一种脂质分子，BODIPY荧光染料附着在一条脂肪链上，其最大激发/发射光为505/ 540nm，常用于细胞膜脂质代谢、高尔基标记和脂质转运研究[1]。
本方案来自文献，请根据您的具体需求修改。
一、酵母液泡的BODIPY-C12 Ceramide染色[1]
1. 配置染色储备液：使用氯仿：甲醇（19：1；v/v）混合液溶解BODIPY-C12 Ceramide，浓度为1mg/ml。将50μL贮备液转移至玻璃管中，并在氮气流下干燥至少2小时。将干燥的BODIPY-C12 Ceramide膜重悬于200μL无水乙醇中，转移至微量离心管中并避光储存。
2. 取1mL酵母培养物（0.4%葡萄糖（w/v）基本培养基）收集到1.5mL无菌微量离心管中，3000g离心1分钟。
3. 转移上清液至单独的试管中，加入10μL 34mg/mL BSA（0.4%葡萄糖（w/v）基本培养基）混合并涡旋，再加入20μL BODIPY-C12 Ceramide储备液并再次涡旋以生成BSA-BODIPY-C12 Ceramide工作液（通常浓度为1-10μM）。
4. 工作液加回酵母细胞重悬，30℃孵育1小时。
5. 孵育结束后，3000g离心1分钟，加入无菌MilliQ水清洗3次。
用剩余酵母细胞培养物的上清液重悬细胞，通过荧光显微镜观察：激发/发射最大值分别为505/540nm。
二、活细胞的BODIPY-C12 Ceramide染色[2-3]
1. 配置BSA-BODIPY-C12 Ceramide复合染色液：
(1) 使用氯仿：甲醇（19：1；v/v）混合液溶解BODIPY-C12 Ceramide，浓度为1mM。将50μL贮备液转移至玻璃管中，并在氮气流下干燥至少2小时。将干燥的BODIPY-C12 Ceramide膜重悬于200μL无水乙醇中，转移至微量离心管中并避光储存。
(2) 用10mL不含血清的平衡盐溶液（HBSS/HEPES）或培养基配置0.34mg/mL的BSA溶液，加入200μL BODIPY-C12 Ceramide母液，涡旋搅拌，获得BSA-BODIPY-C12 Ceramide复合工作液（5μM BODIPY-C12 Ceramide+5μM BSA；浓度通常为1-10μM）。
2. 活细胞贴壁染色
(1) 在无菌盖玻片上培养细胞。
(2) 吸去培养皿中的培养基，用HBSS/HEPES冲洗含细胞的盖玻片3次。
(3) 从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4) 4°C或者37°C避光孵育10-30min，吸弃染色液，用HBSS/HEPES清洗2-3次。
(5) 加入新鲜染色液，再次37°C避光孵育10-30min，吸弃染色液，用HBSS/HEPES清洗。
(6) 用无血清细胞培养基或HBSS/HEPES孵育细胞，通过荧光显微镜观察：激发/发射最大值分别为505/540nm。
注意：BODIPY-C12 Ceramide活细胞染色采用“先孵育后换液再孵育”两步法：
①“4°C+37°C”模式：4°C孵育使染料锚定在细胞膜上；换液清除未结合染料；37°C孵育重启细胞活动，细胞内吞染料，用于追踪染料在细胞内的转运路径。该模式要注意细胞对低温的耐受，注意细胞活性。
②“37°C+37°C”模式：37°C孵育使细胞内吞染料；换液清除未结合探针、降低背景；37°C孵育使染料进一步富集，用于获得更强的染色信号。
注意事项：
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Kim H, Lipp NF, Juarez-Contreras I, Wong AM, Budin I. Transport of sphingolipids by yeast Npc2 supports phase separation of the vacuole membrane. Preprint. bioRxiv. 2025;2025.09.14.676161. Published 2025 Sep 17.
[2] Celis JE, ed. Cell Biology: A Laboratory Handbook. 2nd ed. Vol 2. Academic Press; 1998:507-512.
[3] Chazotte B. Labeling the Golgi Apparatus with BODIPY-FL-Ceramide (C5-DMB-ceramide) for Imaging. CSH Protoc. 2008;2008:pdb.prot4931.
| Cas No. | 1246355-58-7 | SDF | |
| 别名 | BODIPY-C12 Ceramide, BODIPY-Ceramide (d18:1/12:0), BODIPY-Cer(d18:1/12:0), BODIPY-N-Lauroyl-D-erythro-Sphingosine, B12Cer | ||
| Canonical SMILES | [F-][B+3]([N-]1C2=C(C)C=C1C)([N](C(C(C)=C3)=C2CCCCCCCCCCC(N[C@H]([C@H](O)/C=C/CCCCCCCCCCCCC)CO)=O)=C3C)[F-] | ||
| 分子式 | C42H70BF2N3O3 | 分子量 | 713.8 |
| 溶解度 | Chloroform: Slightly Soluble,Methanol: Slightly Soluble | 储存条件 | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.401 mL | 7.0048 mL | 14.0095 mL |
| 5 mM | 280.2 μL | 1.401 mL | 2.8019 mL |
| 10 mM | 140.1 μL | 700.5 μL | 1.401 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00% Appearance: A solid
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