用于捕获蛋白酶体检测的CAPA（CAPA for capture proteasome assay）（来自文献，请根据您的需要进行修改）[1][2]。
1. 抗体包被：准备5μg/ml目的抗体包被黑色96孔maxisorp板，然后使用含有2% BSA的PBS进一步封闭1小时。
2. 蛋白酶体捕获：将细胞沉淀在PBS中洗涤，并在裂解缓冲液（50mM Tris, 0.1% NP40, pH 7.5）中以107个细胞/ml的细胞密度在冰上裂解。收集上清液，使用BCA蛋白质测定试剂进行分析，并在裂解缓冲液中将蛋白质含量调节至200μg/ml的浓度。然后在每个孔中加入50μl细胞裂解物，并将板在4°C下孵育2小时。使用定量ELISA检测在这些条件下捕获的蛋白酶体量调整至每孔约200ng[3]。
3. 底物孵育：捕获蛋白酶体后，首先使用20mM Tris缓冲液（含0.1% NP40，pH 7.5）小心洗涤板，在使用20mM Tris缓冲液（pH 7.5）洗涤，以去除多余物质。然后将在20mM Tris缓冲液（pH 7.5）中稀释的蛋白酶体抑制剂加入孔中，并在室温下旋转孵育10分钟。最后，将荧光底Boc-LRR-AMC稀释于20mM Tris缓冲液中，以100μM的浓度加入孔中。
4. 荧光检测：用塑料盖密封板，在37°C下孵育约30分钟。然后使用蛋白酶体-GloMAX或 SpectraMax 190酶标仪在激发波长380nm，发射波长460nm条件下测量荧光值。
References:
[1]. Vigneron N, Abi Habib J, Van den Eynde B J. The capture proteasome assay (CAPA) to evaluate subtype-specific proteasome inhibitors[J]. Data in Brief, 2015, 4: 146-151.
[2]. Vigneron N, Abi Habib J, Van den Eynde B J. The capture proteasome assay: a method to measure proteasome activity in vitro[J]. Analytical biochemistry, 2015, 482: 7-15.
[3]. Guillaume B, Chapiro J, Stroobant V, et al. Two abundant proteasome subtypes that uniquely process some antigens presented by HLA class I molecules[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2010, 107(43): 18599-18604.
