bis-ANS (potassium salt)

目录号: GC42942纯度: >95.00%同义词: 4,4'-二苯胺基-1,1'-联萘-5,5'-二磺酸二钾盐,4,4'-Dianilino-1,1'-binaphthyl-5,5'-disulfonic Acid

一种高亲和力非共价外源荧光染料


bis-ANS (potassium salt)
Cas No.: 65664-81-5
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    Nature
    641, 529–536 (2025)
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    628, 630–638 (2024)
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    632, 686–694 (2024)
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    618, 1017–1023 (2023)
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    610, 366–372 (2022)
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    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
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    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
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    388(6745) (2025)
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    387(6739) (2025)
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    387(6734) (2025)
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    35, 97–116 (2025)
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    34, 683–706 (2024)
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    33, 273–287 (2023)
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    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
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    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

bis-ANS是一种用于分析蛋白质构象的高亲和力非共价外源荧光染料。[1]它与蛋白质的主要相互作用是通过其疏水的苯环和萘环。[2] bis-ANS具有390 nm的最大激发。[3]当在溶液中游离时,它具有523 nm的最大发射,但是当与蛋白质结合时,随着荧光强度的增加而经历蓝移;例如,当与肠脂肪酸结合蛋白(FAPB2)结合时,它具有484-496 nm的最大发射。bis-ANS已被用于标记急性脑切片中机械损伤的神经元。4它还能有效抑制微管装配。[5],[6]

Reference:
[1]. Hawe, A., Sutter, M., and Jiskoot, W. Extrinsic fluorescent dyes as tools for protein characterization. Pharm. Res. 25(7), 1487-1499 (2008).
[2]. Bothra, A., Bhattacharyya, A., Mukhopadhyay, C., et al. A fluorescence spectroscopic and molecular dynamics study of bis-ANS/protein interaction. J. Biomol. Struct. Dyn. 15(5), 959-966 (1998).
[3]. Pastukhov, A.V., and Ropson, I.J. Fluorescent dyes as probes to study lipid-binding proteins. Proteins 53(3), 607-615 (2003).
[4]. Mozes, E., Hunya, A., Toth, A., et al. A novel application of the fluorescent dye bis-ANS for labeling neurons in acute brain slices. Brain Res. Bull. 86(3-4), 217-221 (2011).
[5]. Horowitz, P., Prasad, V., and Luduena, R.F. Bis(1,8-anilinonaphthalenesulfonate). A novel and potent inhibitor of microtubule assembly. J. Biol. Chem. 259(23), 14647-14650 (1984).
[6]. Mazumdar, M., Parrack, P.K., Mukhupadbhyay, K., et al. Bis-ANS as a specific inhibitor for microtubule-associated protein induced assembly of tubulin. Biochemistry 31(28), 6470-6474 (1992).

实验参考方法 Experimental Reference Method

本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。

1、 制备bis-ANS染色液:

(1)配置染料储存液:将bis-ANS溶于DMSO中,配置浓度为5-50mM的储存液。储存液分装后在-20 °C避光保存。

(2)使用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为5-50μM的bis-ANS工作液,使用0.22μm滤膜过滤除菌。

注意:请根据实际情况调整bis-ANS工作液浓度,现用现配。

2、细胞悬浮染色(以6 孔板为例)

(1)悬浮细胞经1000g离心3-5min。弃去上清液,使用PBS清洗两次,每次5分钟。

(2)贴壁细胞使用PBS清洗两次,加入胰酶消化细胞,消化完成后经1000g离心3-5min。

(3)加入1mL染料工作液重悬细胞,室温避光孵育15-30分钟,不同细胞最佳培养时间不同。

(4)孵育结束后,经1000g离心5分钟,去除上清液,加入PBS清洗2-3次,每次5分钟。

(5)使用无血清细胞培养基或PBS重悬细胞,通过荧光显微镜或流式细胞技术进行观察。

3、细胞贴壁染色

(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。

(2)从培养基中移走盖玻片,吸出过量的培养基,加入PBS清洗1-2次,并将盖玻片放在潮湿的环境中。

(3)从盖玻片的一角加入100μL染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞,室温避光孵育15-30分钟。

(4)吸弃染料工作液,使用PBS清洗盖玻片2~3次,每次5分钟。

4、bis-ANS检测蛋白表面疏水性变化

(1)使用5-50μM的bis-ANS工作液稀释蛋白,至蛋白终浓度为5-10μM。请根据具体实验需求选定合适的染料工作浓度。

(2)使用荧光分光光度计记录400-600 nm处的发射光谱,减去缓冲液中游离bis-ANS的荧光信号。

5、显微镜检测:使用光学显微镜或流式细胞仪对染色细胞进行检测,bis-ANS的最大激发光为390 nm。溶液中游离bis-ANS的最大发射光为523 nm,但与蛋白结合后发生蓝移,荧光强度增加,最大发射光转移至484-496 nm。

注意事项:

1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

产品文档 Product Documents

Purity:>95.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
65664-81-5
同义词
4,4'-二苯胺基-1,1'-联萘-5,5'-二磺酸二钾盐,4,4'-Dianilino-1,1'-binaphthyl-5,5'-disulfonic Acid
化学名
4,4'-bis(phenylamino)-[1,1'-binaphthalene]-5,5'-disulfonic acid, dipotassium salt
SMILES
[O-]S(C1=CC=CC2=C1C(NC3=CC=CC=C3)=CC=C2C4=C(C=CC=C5S([O-])(=O)=O)C5=C(NC6=CC=CC=C6)C=C4)(=O)=O.[K+].[K+]
分子式
C32H22N2O6S2•2K
分子量
672.9 g/mol
溶解性
30 mg/ml in DMSO, 30 mg/ml in DMF, Slightly soluble in Ethanol
保存条件
Store at -20°C, protect from light
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备 RT,或根据请求配备蓝冰。

计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol