BCA Protein Assay Kit是一种即用型总蛋白含量测定试剂盒，检测范围20-2000μg/mL。
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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BCA Protein Assay Kit是一种即用型的总蛋白分析试剂, 可通过测量562 nm处的吸光度并与蛋白标准物的吸光度-浓度曲线进行比较, 快速测定总蛋白浓度。
本试剂盒适用于对纯化蛋白、动植物组织样本以及各类细胞样本进行总蛋白含量测定，检测浓度范围20-2000μg/mL。随着蛋白质浓度的增加, 吸光度与蛋白浓度呈线性关系。
本试剂盒是基于BCA (Bicin-choninic Acid) 法研制而成, 实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。 其原理是在碱性条件下，蛋白将Cu2+还原成Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫色的络合物，这种水溶性复合物在562 nm处表现出很强的吸光度。
如果需要精确定量待测蛋白质, 建议选择质量与待测蛋白质相似的蛋白质标准品。例如, 在测定免疫球蛋白样品时, 可以使用牛γ球蛋白 (BGG) 标准品。
此外，本试剂盒提供一系列浓度梯度的BSA（Bovine Serum Albumin，牛血清白蛋白）标准品，浓度范围125-2000μg/mL，无需进行一系列梯度稀释过程，检测过程更加快捷。
以微孔酶标仪检测法为例：
1、以50:1的比例混合BCA试剂A和BCA试剂B。即将50 ml BCA试剂A与1 ml BCA试剂B混合。
注意: 使用以下公式确定所需工作试剂的总量：
(标准品+待测样品) * (重复次数) * (每个样品所需要的BCA工作液) =所需BCA工作液总体积。
2、将25μl的每种标准品和蛋白质样品添加到单独的微孔板孔中。
注意：如果蛋白样品十分珍贵，可以使用PBS将蛋白样品稀释5-10倍，并在计算蛋白浓度时乘以稀释倍数。
3、向每个孔中添加200μl BCA工作试剂并混合。
4、密封板并在37℃下孵育30分钟。
5、将板冷却至室温(RT)。
6、在10分钟内在读板器上测量562 nm的吸光度。
7、从所有读数中减去空白的OD562，绘制BSA标准曲线: OD562 (在Y轴上) 对BSA标准浓度 (在X轴上)。
8、使用标准曲线确定每个待测样品的蛋白质浓度。
重要产品信息
1.如果将本试剂盒冷藏或存放在冷库中, 则试剂A或试剂B中可能会形成沉淀物。要溶解沉淀物, 请在37°C下缓慢加热溶液, 同时进行混合或微波处理几秒钟. 如果试剂盒被细菌污染, 则将其丢弃。
2.如果样品中仍然存在还原性物质或金属螯合物而引起干扰, 建议使用Bradford分析试剂盒(GK10027)。
3.建议一式两份地测定不同浓度和样品的标准液. 每种测定均应绘制标准曲线。
4.彻底混合试剂A和试剂B后, 新形成的绿色浊度将消失. 它不会影响性能。
5.使用分光光度计检测蛋白质浓度时, 测定的样品量将减少. 使用37°C的培养箱时, 请防止水蒸发的影响。
6.消除或最小化干扰物质影响的几种方法:
•通过透析或凝胶过滤去除干扰物质。
•稀释样品，直到物质不再干扰为止。
•由于高浓度的去污剂也会影响结果, 因此请用三氯乙酸 (TCA) 沉淀样品中的蛋白质。
7，避免使用包括还原性物质, 螯合剂, 强酸和强碱在内的物质, 因为即使浓度很低也会干扰蛋白质的估算。
| Components | 500 tests | 2500 tests | ||
| BCA Reagent A | 100mL | 100 mL ×5 | ||
| BCA Reagent B | 3mL | 3 mL × 5 | ||
| BSA Protein Standards | ① | 2000μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 |
| ② | 1500μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| ③ | 1000μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| ④ | 750μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| ⑤ | 500μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| ⑥ | 250μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| ⑦ | 125μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| ⑧ | 0μg/ml | 1mL | 1 mL × 5 | |
| 应用&特点 | 蛋白质印迹
蛋白质表达测定 蛋白质分析和表征 蛋白质定量测定 |
| 运输方式 | 蓝冰运输. |
| 储存条件 | 试剂A和B, 室温保存一年有效. 蛋白标准室温保存, 一个月有效; 4°C保存, 一年有效; -20°C可以长期保存. |
| 用途 | 仅供研究使用!不能用于人体。 |
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