AF488 NHS ester

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AF488 NHS ester是一种胺特异性荧光探针,最佳激发波长为488nm,发射波长为525nm。

AF488 NHS ester
Cas No.: 1374019-99-4
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文献被引

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  • Nature cover
    Nature
    641, 529–536 (2025)
  • Nature cover
    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
  • Cell cover
    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

AF488 NHS ester is an amine-specific fluorescent probe with optimal excitation wavelength of 488nm and the emission wavelength of 525nm[1]. AF488 NHS ester is pH-sensitive and emits fluorescence at low pH values, which can be used to detect the entry of nanoparticles into lysosomes with low pH levels[2]. AF488 NHS ester can be used to label viruses for tracking virus-cell interactions[3]. AF488 NHS ester can be used to prepare antibodies against Staphylococcus aureus(S. aureus), thereby establishing a S. aureus detection method based on fluorescence immunosorbent assay[4].

References:
[1] Kendall C G, Stockton A M, Leicht S, et al. Amine analysis using AlexaFluor 488 succinimidyl ester and capillary electrophoresis with laser‐induced fluorescence[J]. Journal of Analytical Methods in Chemistry, 2015, 2015(1): 368362.
[2] Vaughan H J, Est-Witte S, Dockery L T, et al. A high-throughput lysosome trafficking assay guides ligand selection and elucidates differences in CD22-targeted nanodelivery[J]. Science and Technology of Advanced Materials, 2024, 25(1): 2351791.
[3] Zhang S L X, Tan H C, Hanson B J, et al. A simple method for Alexa Fluor dye labelling of dengue virus[J]. Journal of virological methods, 2010, 167(2): 172-177.
[4] Kim J K, Yun H Y, Kim J S, et al. Development of fluorescence-linked immunosorbent assay for rapid detection of Staphylococcus aureus[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2024, 108(1): 2.

AF488 NHS ester是一种胺特异性荧光探针,最佳激发波长为488nm,发射波长为525nm[1]。AF488 NHS ester具有pH敏感性,在低pH值时发出荧光,可用于检测纳米颗粒进入低pH值溶酶体的过程[2]。AF488 NHS ester可用于标记病毒,以追踪病毒与细胞的相互作用[3]。AF488 NHS ester可用于制备针对金黄色葡萄球菌(S. aureus)的抗体,从而建立基于荧光免疫吸附法的金黄色葡萄球菌检测方法[4]

实验参考方法 Experimental Reference Method

基于AF488 NHS ester的检测方法

本方案仅提供了一种指导原则,具体操作需根据您的实际需求进行调整。

1. 准备染色溶液

(1)制备标准溶液:用高质量无水二甲基亚砜(DMSO)配制浓度为1mM的AF488 NHS ester标准溶液。注意:将未用完的标准溶液分装并存放在避光条件下于-20°C下保存,以避免反复冻融。

(2)制备工作溶液:用合适的缓冲液(如PBS)将标准溶液稀释,配制浓度为1μM的工作溶液。请根据实际情况调整工作液的浓度,并立即准备,以避免反复冻融。注意:工作溶液必须在实验当天新鲜配制。

2. 蛋白质制备

(1)使用离心过滤器或脱盐柱将蛋白质转移到0.1M的NaHCO3缓冲液(pH 8.3)中。

(2)在280nm波长处测量吸光度,并计算浓度,然后将AF488 NHS ester与蛋白质以3:1的摩尔比混合(染料:蛋白质),使每份蛋白质中染料含量为0.8-1.0μg。

(3)在黑暗中于室温下轻轻搅拌孵育1小时。

3. 淬火与检测

(1)向每100μl反应体积中加入10µl 1M的Tris(pH 8.0),并孵育15分钟。

(2)通过凝胶过滤或离心脱盐(在事先用 PBS 预平衡的条件下)去除未反应的染料,并通过流式细胞技术进行测量。

4. 注意事项:

(1)所有荧光染料都存在猝灭问题。请尽可能避免光照,以减缓荧光猝灭现象的发生。

(2)为了您的安全与健康,请在操作时穿戴实验服和一次性手套。

(3)AF488 NHS ester在整个实验过程中都应存放在黑暗环境中。

(4)保持反应溶液的pH值在8.0-8.5之间;较低的pH值会减缓偶联反应,较高的pH值则会增加水解反应。

(5)本实验方案及所有试剂仅供科学研究使用。

References:

[1] Wang J, Bhattacharyya J, Mastria E, et al. A quantitative study of the intracellular fate of pH-responsive doxorubicin-polypeptide nanoparticles[J]. Journal of Controlled Release, 2017, 260: 100-110.

产品文档 Product Documents

Purity:>98.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
1374019-99-4
分子式
C31H32N4O13S2
分子量
732.74 g/mol
溶解性
good in water, DMF, DMSO
保存条件
Store at -20°C, protect from light
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备 RT,或根据请求配备蓝冰。

计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol