Sulfo-NHS-Biotin

目录号: GC10804纯度: >98.00%同义词: 生物素3-磺酸基-N-羟基琥珀酰亚胺钠盐,Sulfo-NHS Biotin
Sulfo-NHS-Biotin是一种胺反应性生物素化试剂,主要用于对抗体、蛋白质和其他含伯胺(-NH2) 的大分子进行简单有效的生物素化标记。

Sulfo-NHS-Biotin
Cas No.: 119616-38-5
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1

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    Nature
    641, 529–536 (2025)
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    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
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    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
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    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

Sulfo-NHS-Biotin is an amine-reactive biotinylation reagent, mainly used for simple and effective biotinylation labeling of antibodies, proteins and other macromolecules containing primary amines (-NH2)[1]. Sulfo-NHS-Biotin is a simple NHS ester-activated biotinylation reagent composed of natural biotin valerate groups with an arm length of 13.5A[2]. Sulfo-NHS-Biotin is a water-soluble analog obtained by adding a negatively charged sulfonic acid group to the NHS-biotin structure[3]. Sulfo-NHS-Biotin can label surface proteins of the entire cell without penetrating the cell membrane[4].

 

References:

[1] Elia G. Biotinylation reagents for the study of cell surface proteins[J]. Proteomics, 2008, 8(19): 4012-4024.

[2]Cohen L, Walt D R. Evaluation of antibody biotinylation approaches for enhanced sensitivity of single molecule array (Simoa) immunoassays[J]. Bioconjugate Chemistry, 2018, 29(10): 3452-3458.

[3] Ahmed K K, Geary S M, Salem A K. Engineering the Surface of Cells Using Biotin–Avidin Chemistry[M]Micro-and Nanoengineering of the Cell Surface. William Andrew Publishing, 2014: 143-155.

[4]Reglero-Real N, Pérez-Gutiérrez L, Yoshimura A, et al. Autophagy modulates endothelial junctions to restrain neutrophil diapedesis during inflammation[J]. Immunity, 2021, 54(9): 1989-2004. e9.

Sulfo-NHS-Biotin是一种胺反应性生物素化试剂,主要用于对抗体、蛋白质和其他含伯胺(-NH2) 的大分子进行简单有效的生物素化标记[1]。Sulfo-NHS-Biotin是一种简单NHS酯活化的生物素化试剂,由天然生物素戊酸基团组成,臂长13.5A[2]。Sulfo-NHS-Biotin 是一种水溶性类似物,是通过在NHS-biotin结构上添加带负电荷的磺酸基而获得的[3]。Sulfo-NHS-Biotin可以对整个细胞的表面蛋白进行标记,不会渗透细胞膜[4]

实验参考方法 Experimental Reference Method

本方案仅提供一个指导,请根据您的具体需要进行修改。

 1.溶液配制

(1)工作液:称量固体,用Milli-Q水或其他适合的缓冲液稀释到所需的工作浓度。

注意:固体避光保存在-20°C或-80°C。最佳的工作浓度请根据实际情况调整或参阅文献自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。

 

2.采用Sulfo-NHS-Biotin进行细胞表面蛋白生物素化标记[1](来自文献,仅做参考)

(1)细胞刺激:HUVEC细胞在60 mm培养皿中培养,用LPS (1 μg/ml) 刺激细胞4小时。

(2)细胞表面蛋白的标记:将培养皿上的HUVEC单层与0.1 mg/ml Sulfo-NHS-Biotin的PBS溶液(补充有1.5 mM Ca2+)在 4°C下孵育30分钟,以最大程度地减少生物素化反应过程中细胞表面蛋白的内化。

(3)洗涤细胞:用冷的PBS溶液(补充有1.5 mM Ca2+)洗涤细胞,充分洗涤3次以除去过量的Sulfo-NHS-Biotin。

(4)继续培养细胞:用冷的DMEM溶液(补充有10% FBS)孵育细胞,以淬灭任何剩余的游离生物素试剂。

(5)洗涤细胞:细胞培养完成后经历另一次洗涤,以确保去除任何未结合的生物素。

(6)细胞裂解:细胞直接原位裂解,将细胞匀浆通过0.6 mm、24G针进行裂解,然后将裂解物以14000 rpm离心5分钟,以沉淀不溶性碎片。

(7)蛋白质分析:部分上清液作为总裂解液保存,使用NeutrAvidin琼脂糖分离生物素化蛋白质以进行后续分析。

 

注意:本实验提供了一项采用Sulfo-NHS-Biotin进行细胞表面蛋白生物素化标记的参考,Sulfo-NHS-Biotin的浓度和孵育时间需要根据细胞类型和所需的标记密度来优化。实验过程中尽量避免使用含有氨基酸、蛋白质或其他活性化合物的缓冲液,这些物质可能与生物素反应。

产品文档 Product Documents

Purity:>98.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
119616-38-5
同义词
生物素3-磺酸基-N-羟基琥珀酰亚胺钠盐,Sulfo-NHS Biotin
化学名
sodium;1-[5-[(3aS,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate
SMILES
C1C(C(=O)N(C1=O)OC(=O)CCCCC2C3C(CS2)NC(=O)N3)S(=O)(=O)[O-].[Na+]
分子式
C14H18N3NaO8S2
分子量
443.4 g/mol
溶解性
≥ 22.17mg/mL in DMSO, ≥ 59.9 mg/mL in Water with ultrasonic
保存条件
Desiccate at -20°C, Unstable in solution, prepare and use immediately
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备 RT,或根据请求配备蓝冰。

计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol