保存与运输方法
保存： -20℃避光干燥保存，至少1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1)本品的DMSO 储存液需分装成单次用量后， -20℃避光保存，避免反复冻融。所有工作液现配现用。
2)整个操作过程中注意避光。
3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、储存液制备
将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。 之后往瓶内加入适量无水DMSO 充分溶解配成2~5mM 储存液(比如，1mg ROSGreen TMH2O2Probe(Mw:~600) 加入333μl DMSO,充分溶解混匀后即得到5mM 储存液)。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。
2、工作液准备
正式实验前，或取粉末按照【储存液制备】用DMSO溶解，或于室温融化一管DMSO储存液。
2.1 对于溶液H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备2x 工作液，用20mM Hepes缓冲液或其他缓冲液 (pH7.0) 稀释储存液。工作液现配现用。建议使用5μM终 浓度的ROSGreenTMH2O2Probe, 测定溶液体系中H2O2浓度。
2.2 对于细胞H2O2 测定，按照2~20μM 工作液浓度制备1×工作液，用含20mM Hepes缓冲液的HBSS,pH 7.0 或PBS 稀释储存液。工作液现配现用。
3、 上清液H2O2 测定
【以下为溶液H2O2 测定的推荐步骤，仅作参考，请根据具体需求做优化调整。】
3.1于96孔板，加50μl 2×ROSGreenTMH2O2Probe工作液到每个孔 (H2O2标准、空白对照、待测样本)内使总的测定体积为100μl/孔。 【注意：对于384孔板，加25μl样品和25μl 2xROSGreenTMH2O2Probe工作液，使得测定体积为50μl/ 孔。】
3.2室温避光解育反应体系15~60min。
3.3荧光酶标板内监测用荧光增强，Ex/Em=490/525nm。
3.4空白孔(只含有反应缓冲液)的荧光用作对照，其他孔的荧光值需减掉空白对照孔荧光。
4、活细胞H2O2 测定
【ROSGreenTMH2O2Probe能主动扩散进入活细胞，且能反映胞内H2O2微摩尔浓度变化。以下是推荐的活细胞H2O2显微成像检测步骤，仅作参考，可根据具体需 求优化调整。】
4.1按照步骤2.2配制1×ROSGreenTMH2O2Probe 工作液。工作液现配现用。
4.2按照实验要求处理细胞。
4.3用1×ROSGreenTMH2O2Probe 工作液避光孵育细胞5~60min或适合自身需求的时间。用PBS清洗细胞2次。
4.4用荧光酶标板(底部读数模式)监测荧光增强，Ex/Em=490/525nm。或者用荧光显微镜的FITC通道成像检测荧光增强。
染色示例
图1.Costar 黑色96孔培养板内CHO-K1 活细胞用ROSGreenTMH2O2Probe 的染色图。图A: 对照细胞；图B: 用H2O2(100μM) 处理5min后的细胞
