Hexa-His是一种由连续六个组氨酸残基组成的氨基酸序列标签，Hexa-His通过组氨酸上的咪唑基团与金属离子特异性结合，实现基于固定化金属离子亲和层析的高效蛋白质纯化。
Cas No.:64134-30-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Hexa-His is an amino acid sequence tag composed of six consecutive histidine residues. Hexa-His achieves efficient protein purification based on immobilized metal ion affinity chromatography (IMAC) through the specific binding of the imidazole groups on histidine to metal ions. Hexa-His can be used in the purification of recombinant proteins, the study of protein-protein interactions, and research on protein-based supramolecular biopolymers[1-4].
References:
[1] Guo M, Lv M, Shao Y, et al. Bax functions as coelomocyte apoptosis regulator in the sea cucumber Apostichopus japonicus. Dev Comp Immunol. 2020 Jan;102:103490.
[2] Guo M, Chen K, Lv Z, et al. Bcl-2 mediates coelomocytes apoptosis by suppressing cytochrome c release in Vibrio splendidus challenged Apostichopus japonicus. Dev Comp Immunol. 2020 Feb;103:103533.
[3] Kummarapurugu AB, Hawkridge AM, Ma J, et al. Neutrophil elastase decreases SARS-CoV-2 spike protein binding to human bronchial epithelia by clipping ACE-2 ectodomain from the epithelial surface. J Biol Chem. 2023 Jun;299(6):104820.
[4] Slagle AK, Ghiringhelli Borsa N, Wang K, et al. Factor H-related 1 and heparan sulfate architecture contribute to complement dysregulation in C3 glomerulopathy. Front Immunol. 2025 May 16;16:1589674.
Hexa-His是一种由连续六个组氨酸残基组成的氨基酸序列标签，Hexa-His通过组氨酸上的咪唑基团与金属离子特异性结合，实现基于固定化金属离子亲和层析的高效蛋白质纯化。Hexa-His可用于重组蛋白纯化、蛋白质相互作用研究以及蛋白质超分子生物聚合的相关研究[1-4]。
Hexa-His标签亲和力测定[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1.试剂准备：准备带有Hexa-His储备液，将DYE-tris-NTA荧光探针（BLUE-、GREEN-、RED-tris-NTA）溶解于PBST缓冲液（137mM NaCl，2.5mM KCl，10mM Na2HPO4，2mM KH2PO4，pH=7.4，0.05% Tween-20）中备用。
2. 亲和力测定：将带Hexa-His在PBST缓冲液中进行一系列稀释。向所有稀释管中加入固定浓度（50nM）的DYE-tris-NTA染料。将混合物在室温下避光孵育30分钟。将样品吸入专用毛细管，置于MicroScale Thermophoresis中，在合适的LED功率和中等MST功率下进行测量，通过结合曲线计算解离常数（Kd）。
注意事项：
（1）该方法对常见缓冲液添加剂（如BSA、还原剂TCEP/DTT）耐受性高，但应避免使用强螯合剂（如EDTA、EGTA）、离子型去垢剂（如SDS）和高浓度（>1mM）的竞争性物质（如咪唑、组氨酸）。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Bartoschik T, Galinec S, Kleusch C, et al. Near-native, site-specific and purification-free protein labeling for quantitative protein interaction analysis by MicroScale Thermophoresis. Sci Rep. 2018 Mar 21;8(1):4977.
| Cas No. | 64134-30-1 | SDF | |
| 分子式 | C36H44N18O7 | 分子量 | 840.85 |
| 溶解度 | Water: 50 mg/mL (59.46 mM) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.1893 mL | 5.9464 mL | 11.8927 mL |
| 5 mM | 237.9 μL | 1.1893 mL | 2.3785 mL |
| 10 mM | 118.9 μL | 594.6 μL | 1.1893 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.50% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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