Suc-Ala-Phe-Lys-AMC是一种高度敏感的荧光底物。
Cas No.:73207-91-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Suc-Ala-Phe-Lys-AMC is a highly sensitive fluorogenic substrate. Suc-Ala-Phe-Lys-AMC can be specifically recognized and cleaved by plasmin, releasing the AMC fluorophore. Enzyme activity is quantified by measuring the change in fluorescence intensity. Suc-Ala-Phe-Lys-AMC can be used for the detection and related research of plasmin and gingipain K[1-2].
References:
[1] Götz MG, James KE, Hansell E, et al. A new class of potent and selective inhibitors of asparaginyl endopeptidases (legumains) from evolutionarily diverse pathogens. J Med Chem. 2008 May 8;51(9):2816-32.
Suc-Ala-Phe-Lys-AMC是一种高度敏感的荧光底物。Suc-Ala-Phe-Lys-AMC可被纤溶酶特异性识别并切割，释放AMC荧光基团，通过检测荧光强度变化定量分析酶活性，Suc-Ala-Phe-Lys-AMC可用于纤溶酶和牙龈蛋白酶K的检测及相关研究[1]。
Suc-Ala-Phe-Lys-AMC测定血浆酶活性[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1. 试剂准备：将Suc-Ala-Phe-Lys-AMC溶解在缓冲液中，用于制备工作浓度（如0.045mM的Ala-Phe-Lys-AMC或0.8mM的Suc-Ala-Phe-Lys-AMC）的底物溶液。使用0.05M的Tes/NaOH缓冲液（pH=7.5）。配制20%的二甲亚砜溶液作为辅助溶剂，该浓度对酶活性无影响。制备系列浓度的血浆酶标准品溶液。
2. 样品预处理：对于粗提物样品，为避免氨基肽酶对底物的非特异性水解，必须使用氨基被保护的底物，如Suc-Ala-Phe-Lys-AMC。细胞培养液样品可离心去除细胞碎片后直接使用。在需要检测血浆酶原激活剂或凝血酶存在的样品时，可准备抑制剂Trasylol。
3. 血浆酶活性检测：在24°C条件下，于0.5mL的最终反应体系中加入底物溶液、Tes缓冲液和20%二甲亚砜。然后加入酶溶液或待测样品启动反应。反应时间通常为5分钟或根据酶活性调整。
4. 荧光测定与定量：使用荧光分光光度计测定在标准条件下的荧光强度。通过荧光强度变化率，对照标准曲线，计算酶活性。
注意事项：
（1）该方法灵敏度极高，可检测低至10⁻⁵CTA单位血浆酶，反应速率在至少100倍的酶浓度范围内呈线性。通过利用抑制剂Trasylol和底物的动力学常数差异，可以在凝血酶或尿激酶等存在下，特异性地测定血浆酶活性。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Pierzchala PA, Dorn CP, Zimmerman M. A new fluorogenic substrate for plasmin. Biochem J. 1979 Dec 1;183(3):555-9. doi: 10.1042/bj1830555.
| Cas No. | 73207-91-7 | SDF | |
| 分子式 | C32H39N5O8 | 分子量 | 621.69 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.6085 mL | 8.0426 mL | 16.0852 mL |
| 5 mM | 321.7 μL | 1.6085 mL | 3.217 mL |
| 10 mM | 160.9 μL | 804.3 μL | 1.6085 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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