Boc-Lys-AMC是一种含有AMC(7-氨基-4-甲基香豆素)的二肽荧光底物。
Cas No.:116883-12-6
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Boc-Lys-AMC is a dipeptide fluorescent substrate containing AMC (7-amino-4-methylcoumarin). Boc-Lys-AMC has poor enzyme cleavage kinetics and is mainly used as a deacetylated readout product in Histone DeACetylase (HDAC) fluorescence detection systems or as a fluorescent control substrate for some protease activity assays[1][2].
References:
[1] Wegener D, Wirsching F, Riester D, Schwienhorst A. A fluorogenic histone deacetylase assay well suited for high-throughput activity screening. Chem Biol. 2003;10(1):61-68.
[2] Ueki N, Wang W, Swenson C, McNaughton C, Sampson NS, Hayman MJ. Synthesis and Preclinical Evaluation of a Highly Improved Anticancer Prodrug Activated by Histone Deacetylases and Cathepsin L. Theranostics. 2016;6(6):808-816.
Boc-Lys-AMC是一种含有AMC(7-氨基-4-甲基香豆素)的二肽荧光底物。Boc-Lys-AMC被酶切割的动力学较差,主要用作组蛋白去乙酰化酶(HDAC)荧光检测系统中的去乙酰化读出产物,或作为一些蛋白酶活性测定的荧光对照底物[1][2]。
酶活性检测[1]
本方案来自文献,请根据您的具体需求修改。
1.制备底物工作液
(1)配置储存液:使用DMSO溶解Boc-Lys-AMC配置储存液,浓度为10-50mM。
注意:未使用的储存液分装后在-20°C或-80°C避光保存,避免反复冻融。
(2)配置工作液:使用反应缓冲液稀释储存液。
注意:工作液现配现用,4℃或冰上短暂保存。
2.制备酶工作液:用反应缓冲液稀释酶。
3.准备一个96孔板:
反应孔:加入Boc-Lys-AMC底物与酶混合液,浓度分别为10-50μM和5-50nM。
空白孔:加入Boc-Lys-AMC底物,浓度为10-50μM,加反应缓冲液补齐体积。
4. 96孔板37℃预孵育10-60min。
6.荧光分光光度计测量350-360nm激发下440-460nm处的荧光强度。
注意事项:
1)荧光底物存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Ueki N, Wang W, Swenson C, McNaughton C, Sampson NS, Hayman MJ. Synthesis and Preclinical Evaluation of a Highly Improved Anticancer Prodrug Activated by Histone Deacetylases and Cathepsin L. Theranostics. 2016;6(6):808-816.
| Cas No. | 116883-12-6 | SDF | |
| 分子式 | C21H29N3O5 | 分子量 | 403.48 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.4784 mL | 12.3922 mL | 24.7844 mL |
| 5 mM | 495.7 μL | 2.4784 mL | 4.9569 mL |
| 10 mM | 247.8 μL | 1.2392 mL | 2.4784 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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