ER-Tracker Green 是一种内质网特异性的荧光染料。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| 1mg | ¥1,944.00 | 现货 | 1 | |
| 5mg | ¥4,860.00 | 现货 | 1 | |
| 10mg | ¥7,830.00 | 现货 | 1 |
ER-Tracker Green is a fluorescent dye that specific for endoplasmic reticulum[1].
ER tracker Green (1 mM, incubated in OptiMEM for 30 min at 37 °C) is used for endoplasmic reticulum staining[1].
References:
[1]. J Jacob Strouse, et al. Fluorescent substrates for flow cytometric evaluation of efflux inhibition in ABCB1, ABCC1, and ABCG2 transporters. Anal Biochem. 2013 Jun 1;437(1):77-87.
ER-Tracker Green 是一种内质网特异性的荧光染料[1]。
ER Tracker Green（1 mM，使用前在OptiMEM培养基中37°C孵育30分钟）可用于内质网染色[1]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1.制备染色液
(1)配置DMSO储存液:使用DMSO溶解ER-Tracker Green，配置浓度为1mM的储存液。
注意:未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
(2)配置工作液:用合适的缓冲液(如:无血清培养基或PBS)稀释储存液，配制浓度为100 nM-1 μM的工作液。
注意:请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2.细胞悬浮染色
(1)悬浮细胞：经4°C、1000g离心3-5分钟，弃去上清液，用PBS清洗两次，每次5分钟。
(2)贴壁细胞：使用PBS清洗两次，加入胰酶消化细胞，消化完成后经1000g离心3-5min。
(3)加入1mL的ER-Tracker Green工作溶液重悬约106个细胞，室温避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(4)孵育结束后，经1000g离心5分钟，去除上清液，加入PBS清洗2-3次，每次5分钟。
(5)用预温的无血清细胞培养基或PBS重悬细胞。通过荧光显微镜或流式细胞术观察。
3.细胞贴壁染色
(1)在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。
(2)从培养基中移走盖玻片，吸出过量的培养基，将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)从盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)室温避光孵育5-30分钟。不同细胞最佳孵育时间不同，请根据具体实验需求自行摸索。
(5)孵育结束后吸弃染料工作液，使用预温的培养液清洗盖玻片2~3次。
4.显微镜检测：ER-Tracker Green的最大激发光/发射光分别为489/520 nm。
注意事项：
① 如果要固定染色的细胞，建议使用4%甲醛在37℃下固定2分钟；
② 如果染色细胞需要通透，建议使用ER–Tracker Blue–White DPX（GB30171）；
③ 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭；
④ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
