Cyanine5.5 maleimide是一种近红外荧光染料标记试剂(Ex=673nm;Em=707nm)。
Cas No.:1593644-50-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Cyanine5.5 maleimide is a near-infrared fluorescent dye labeling reagent (Ex=673nm; Em=707nm). The maleimide group reacts with the SH-thiol group to form a thioether bond, thereby labeling proteins, peptides, antibodies, etc., containing cysteine molecules.
Cyanine5.5 maleimide是一种近红外荧光染料标记试剂(Ex=673nm;Em=707nm)。Maleimide基团能与SH巯基反应生成硫醚键,从而标记含半胱氨酸分子的蛋白、肽、抗体等。
本方案来自文献,请根据您的具体需求修改。
1.Cyanine5.5 maleimide原液:用无水DMSO溶解Cyanine5.5 maleimide染料,制成10mM储备溶液,用移液或涡旋溶解均匀。
注:染料原液的长期储存可能会降低染料的活性,需尽快使用。Cyanine5.5 maleimide储存液建议分装后-20℃或-80℃避光保存,避免反复冻融。
2.蛋白原液:用PBS/HEPES将待标记蛋白稀释为2mg/ml,pH=7.5±0.5。
注:(1)如果蛋白质浓度低于2mg/ml,结合效率会显著降低。为了获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为2-10mg/ml。(2)蛋白溶液pH值应为7.5±0.5,pH太低影响标记效率,太高可能导致非特异性标记。(3)如果您的蛋白不含游离的半胱氨酸,需要用DTT或TCEP等硫醇类还原剂来处理蛋白以生成巯基,需在偶联之前通过透析或凝胶过滤去除蛋白溶液中游离的DTT。
3. Cyanine5.5 maleimide与待标记蛋白按照5:1的摩尔比计算体积,将Cyanine5.5 maleimide染料缓慢加入蛋白样品中,轻轻摇匀混合,短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀,防止蛋白样品变性失活。
注:标记反应所需的染料用量与蛋白性质有关,建议在2-10:1的摩尔比范围内进行摸索。
4.反应小管置于避光处,室温下轻轻摇晃孵育30-60分钟。
5.使用脱盐离心柱与PBS洗去游离染料,收集蛋白偶联物。
| Cas No. | 1593644-50-8 | SDF | |
| 别名 | Cy5.5-马来酰亚胺 | ||
| 分子式 | C46H49ClN4O3 | 分子量 | 741.36 |
| 溶解度 | soluble in organic solvents (DMSO, DMF, dichloromethane), practically insoluble in water (< 1 uM, < 1 mg/L) | 储存条件 | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.3489 mL | 6.7444 mL | 13.4887 mL |
| 5 mM | 269.8 μL | 1.3489 mL | 2.6977 mL |
| 10 mM | 134.9 μL | 674.4 μL | 1.3489 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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