Cy5-DBCO是一种近红外荧光染料Cy5与二苯并环辛炔（DBCO）的生物正交荧光探针（Ex=635nm，Em=650-700nm）。
Cas No.:1564286-24-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Cy5-DBCO is a bioorthogonal fluorescent probe that combines the near-infrared dye Cy5 with dibenzocyclooctyne (DBCO) (Ex=635nm, Em=650-700nm). Cy5-DBCO enables efficient and specific biomolecule labeling through a copper-free click chemistry reaction between the DBCO group and azides. Cy5-DBCO is used in applications such as bioimaging, protein labeling, cell tracing, and drug delivery system research[1-4].
References:
[1] Song S, Shim MK, Lim S, et al. In Situ One-Step Fluorescence Labeling Strategy of Exosomes via Bioorthogonal Click Chemistry for Real-Time Exosome Tracking In Vitro and In Vivo. Bioconjug Chem. 2020 May 20;31(5):1562-1574.
[2] Zhu L, Xu Y, Wei X, et al. Coupling Aptamer-based Protein Tagging with Metabolic Glycan Labeling for In Situ Visualization and Biological Function Study of Exosomal Protein-Specific Glycosylation. Angew Chem Int Ed Engl. 2021 Aug 9;60(33):18111-18115.
[3] Li L, Wang F, Mo S, et al. A Spatially Distributed Microneedle System for Bioorthogonal T Cell-Guided Cancer Therapy. Adv Sci (Weinh). 2025 Apr;12(13):e2416841.
[4] Xue Y, Li J, Chen D, et al. Observation of structural switch in nascent SAM-VI riboswitch during transcription at single-nucleotide and single-molecule resolution. Nat Commun. 2023 Apr 22;14(1):2320.
Cy5-DBCO是一种近红外荧光染料Cy5与二苯并环辛炔（DBCO）的生物正交荧光探针（Ex=635nm，Em=650-700nm）。Cy5-DBCO通过DBCO与叠氮化物的无铜点击化学反应实现高效、特异的生物分子标记。Cy5-DBCO可用于生物成像、蛋白质标记、细胞示踪以及药物递送系统的研究[1-4]。
Cy5-DBCO标记细胞与示踪的方法[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1.试剂准备：将四乙酰化的N-叠氮乙酰基-D-甘露糖胺（Ac4ManNAz）溶解于完全细胞培养基中，配制成50μM的工作浓度；将Cy5-DBCO溶解于合适的缓冲液（DPBS，pH=7.4）中，配制成工作浓度（体外实验20μM，体内注射25μM）。
2.靶细胞叠氮标记：将目标细胞（A549、KB、U87MG等）以适当密度接种，在含有50μM Ac4ManNAz的完全培养基中培养3天。
3.Cy5-DBCO标记与检测（体外）：将经过Ac4ManNAz处理的细胞用DPBS（pH=7.4）洗涤两次，加入Cy5-DBCO工作液（20μM），在37°C下孵育1小时。用DPBS充分洗涤细胞。对细胞进行固定（甲醛-戊二醛混合固定液）、核染色（DAPI），使用共聚焦激光扫描显微镜（Ex=635nm，Em=650-700nm）进行荧光成像分析。也可用流式细胞术进行定量分析。
4.Cy5-DBCO标记与检测（体内）：将经过Ac4ManNAz处理3天的靶细胞直接注射到活体动物的靶器官；细胞移植3天后，通过尾静脉向小鼠体内注射Cy5-DBCO溶液（25μM，200μL）；探针注射后4小时，利用活体成像系统对动物进行全身荧光成像，观察靶器官处的特异性荧光信号。也可解剖器官，使用荧光成像系统进行离体成像或制作冰冻切片进行显微观察。
注意事项：
（1）未与细胞表面叠氮基团反应的游离Cy5-DBCO主要通过肾脏途径在注射后4小时内被清除，有助于降低背景信号。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Kang SW, Lee S, Na JH, et al. Cell labeling and tracking method without distorted signals by phagocytosis of macrophages. Theranostics. 2014 Feb 12;4(4):420-31.
| Cas No. | 1564286-24-3 | SDF | Download SDF |
| 别名 | DBCO-Sulfo-Cy5 | ||
| 分子式 | C52H56N4O11S3 | 分子量 | 1009.22 |
| 溶解度 | DMSO : 62.5 mg/mL (61.93 mM; Need ultrasonic); H2O : ≥ 10 mg/mL (9.91 mM) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 990.9 μL | 4.9543 mL | 9.9086 mL |
| 5 mM | 198.2 μL | 990.9 μL | 1.9817 mL |
| 10 mM | 99.1 μL | 495.4 μL | 990.9 μL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- Purity: >97.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet