Corticosterone-d8是天然皮质酮的氘代形式,具有糖皮质激素和盐皮质激素活性。
Cas No.:1271728-07-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Corticosterone-d8, the deuterated form of natural corticosterone, possesses glucocorticoid and mineralocorticoid activity. As a labeled tracer, Corticosterone-d8 is widely used to study the mechanisms of stress responses and assess stress levels. Corticosterone-d8 can also be quantitatively analyzed in biological samples via GC-MS or LC-MS to investigate its role in metabolic regulation[1].
References:
[1] Wang Y, Sun C, Cao Y, et al. Glycyrrhizic acid and patchouli alcohol in Huoxiang Zhengqi attenuate intestinal inflammation and barrier injury via regulating endogenous corticosterone metabolism mediated by 11β-HSD1. J Ethnopharmacol. 2025 Feb 10;338(Pt 1):119025.
Corticosterone-d8是天然皮质酮的氘代形式,具有糖皮质激素和盐皮质激素活性。Corticosterone-d8作为标记物可广泛用于研究应激反应的机制和评估应激水平,同时可通过GC-MS或LC-MS定量分析生物样本中的皮质酮水平以研究其在代谢调节中的作用[1]。
Corticosterone-d8法测定11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)氧化酶活性[1]
本实验方案根据研究内容整理,仅供参考,请根据实际需求进行调整。
(1)试剂准备:将Corticosterone-d8溶解于适当的有机溶剂(如甲醇或DMSO)中,配制成所需浓度的储备液,使用时进一步稀释至工作浓度(如4μM);配制含有20mM NADP⁺(用于测定11β-HSD1)或20mM NAD⁺(用于测定11β-HSD2)的缓冲溶液;准备结肠组织匀浆或人重组11β-HSD1(hr11β-HSD1)蛋白。
(2)样品制备:取结肠组织,加入预冷的匀浆缓冲液进行充分匀浆,离心后取上清液作为酶源。或直接使用重组的hr11β-HSD1蛋白溶液。
(3)酶促反应体系建立:在反应体系中依次加入:组织匀浆或hr11β-HSD1蛋白溶液、20μM NADP⁺(或NAD⁺)辅因子、以及4μM的Corticosterone-d8工作液。
(4)11β-HSD氧化酶活性检测:将反应体系在37°C下孵育1小时,使Corticosterone-d8在11β-HSD酶的氧化作用下转化为其产物11-脱氢皮质酮-d8(11-DHC-d8)。反应结束后,加入终止液(如有机溶剂)终止反应。将反应液进行离心,取上清。使用液相色谱-质谱联用(LC-MS)系统,通过多反应监测(MRM)模式,特异性检测生成的11-DHC-d8的峰面积。酶活性以每小时每毫克蛋白生成的11-DHC-d8的量(formed/h/mg protein)进行计算和表示。
注意事项:
(1)该方法通过使用稳定同位素标记的底物(Corticosterone-d8),可有效区分内源性皮质酮的干扰,提高检测的特异性和准确性,适用于复杂生物样品中酶活性的测定。
(2)反应时间、底物浓度、辅因子浓度及pH值需进行优化,以确保反应在线性范围内进行。
(3)Corticosterone-d8为氘代化合物,应妥善保存,避免反复冻融。实验涉及生物样品及化学试剂,操作应在符合规范的实验环境下进行,并穿实验服、戴手套及必要的防护用具。
References:
[1] Wang Y, Sun C, Cao Y, et al. Glycyrrhizic acid and patchouli alcohol in Huoxiang Zhengqi attenuate intestinal inflammation and barrier injury via regulating endogenous corticosterone metabolism mediated by 11β-HSD1. J Ethnopharmacol. 2025 Feb 10;338(Pt 1):119025.
| Cas No. | 1271728-07-4 | SDF | |
| 别名 | 皮质酮 d8 | ||
| Canonical SMILES | O=C1C([2H])([2H])C[C@@]2(C)C(C([2H])([2H])C[C@]3([H])[C@]2([H])[C@@H](O)C[C@@]4(C)[C@@]3([H])CC[C@]4([2H])C(C([2H])([2H])O)=O)=C1[2H] | ||
| 分子式 | C21H22D8O4 | 分子量 | 354.5 |
| 溶解度 | DMSO : 100 mg/mL (282.08 mM; Need ultrasonic); DMSO : 100 mg/mL (282.08 mM; Need ultrasonic and warming); Ethanol : 14.29 mg/mL (40.31 mM; Need ultrasonic); H2O : 0.67 mg/mL (1.89 mM; Need ultrasonic) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度,请将管子加热至37℃,然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备RT,或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.8209 mL | 14.1044 mL | 28.2087 mL |
| 5 mM | 564.2 μL | 2.8209 mL | 5.6417 mL |
| 10 mM | 282.1 μL | 1.4104 mL | 2.8209 mL |
| 第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量) | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg | 动物平均体重 | g | 每只动物给药体积 | ul | 动物数量 | 只 | |||
| 第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方) | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL saline,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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