Coelenterazine h是一种腔肠素衍生物，是一种发光生物分子，最大激发/发射波长约为437/466nm。
Cas No.:50909-86-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Coelenterazine h is a coelenterazine derivative and a bioluminescent molecule with a maximum excitation/emission wavelength of approximately 437/466nm[1, 2]. Coelenterazine h can serve as a highly efficient luminescent substrate for Renilla luciferase (Rluc) and its highly active mutant RLuc8[1]. Coelenterazine h exhibits high sensitivity to Ca2+, a property that makes it an excellent tool for measuring subtle changes in intracellular Ca2+ concentration[3].
References:
[1] Saito K, Hatsugai N, Horikawa K, et al. Auto-luminescent genetically-encoded ratiometric indicator for real-time Ca2+ imaging at the single cell level[J]. PLoS One, 2010, 5(4): e9935.
[2] Chemiluminescence and bioluminescence: past, present and future[M]. Royal Society of Chemistry, 2011.
[3] Krasitskaya V V, Bashmakova E E, Frank L A. Coelenterazine-dependent luciferases as a powerful analytical tool for research and biomedical applications[J]. International journal of molecular sciences, 2020, 21(20): 7465.
Coelenterazine h是一种腔肠素衍生物，是一种发光生物分子，最大激发/发射波长约为437/466nm[1, 2]。Coelenterazine h能够作为RLuc8的高效发光底物[1]。Coelenterazine h对Ca2+具有高度的敏感性，这一特性使其成为测量细胞内Ca2+浓度微小变化的优异工具[3]。
本方案仅提供一个指导，请根据您的具体需要进行修改。
1. 溶液制备
（1）储存液：用甲醇或乙醇溶解Coelenterazine h，配置浓度为10mM的储存液。
注意：未使用的储存液分装后在-20℃或-80°C避光保存，避免反复冻融。
（2）工作液：用PBS或细胞培养基稀释储存液至10µM。
注意：请根据实际情况调整工作液浓度，现用现配。
2. 采用Coelenterazine h进行细胞染色[1]
（1）细胞准备：使用Lipo2000 Transfection Reagent (GK20005)，向Hela细胞中转染编码RLuc8荧光素酶报告基因的质粒。
（2）向细胞培养板中加入配制好的10µM Coelenterazine h工作液。将加样后的细胞板置于37°C、5% CO2的培养箱中，避光孵育1-4h（具体孵育时间需根据实验条件进行优化）。
（3）染色完成后，立即使用荧光显微镜进行检测。建议设置激发/发射波长为437/466nm。
补充说明：
1.Coelenterazine h在1-10µM浓度范围内能够作为RLuc8报告基因的发光底物。
2.在溶液体系的BRAC蛋白Ca2+结合动力学测量中，曾将5nM BRAC蛋白与20µM Coelenterazine h在不同浓度Ca2+缓冲液中快速混合，并在1kHz频率下监测其Venus通道（530nm）的发射强度变化，该条件可供细胞染色实验参考。
References:
[1]Saito K, Hatsugai N, Horikawa K, et al. Auto-luminescent genetically-encoded ratiometric indicator for real-time Ca2+ imaging at the single cell level[J]. PLoS One, 2010, 5(4): e9935.
| Cas No. | 50909-86-9 | SDF | |
| 别名 | 腔肠素-H,2-Deoxycoelenterazine; CLZN-h | ||
| Canonical SMILES | OC1=CC=C(C2=CN3C(N=C(CC4=CC=CC=C4)C3=O)=C(CC5=CC=CC=C5)N2)C=C1 | ||
| 分子式 | C26H21N3O2 | 分子量 | 407.5 |
| 溶解度 | Ethanol: 0.5 mg/ml*,Methanol: 0.5 mg/ml* | 储存条件 | Store at -20°C ,protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.454 mL | 12.2699 mL | 24.5399 mL |
| 5 mM | 490.8 μL | 2.454 mL | 4.908 mL |
| 10 mM | 245.4 μL | 1.227 mL | 2.454 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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- SDS (Safety Data Sheet)
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