Biotin-PEG4-azide

目录号: GC63343纯度: >98.00%同义词: 生物素-PEG4-叠氮
Biotin-PEG4-azide是一种不可切割的叠氮化生物素化试剂,广泛应用于蛋白质标记、分子成像检测和靶向治疗剂的开发等领域。

Biotin-PEG4-azide
Cas No.: 1309649-57-7
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文献被引

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  • Nature cover
    Nature
    641, 529–536 (2025)
  • Nature cover
    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
  • Cell cover
    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

Biotin-PEG4-azide is non-cleavable, azide-activated biotinylation reagent, that widely applied in protein labeling, detection to molecular imaging and the development of targeted therapeutic agents[1]. With The azide group highly reactive in copper(I)-catalyzed alkyne-azide cycloaddition (CuAAC) reaction, Biotin-PEG4-azide can be used to label proteins with biotin and allow for the detection or capture of proteins using streptavidin[2][3][4].

References:
[1] Wang L, Punzalan C, Bajrami B,et al. Multiplying Identifiability of Clickable Peptides Using One-Pot Tagging of Homologous Biotinyl Azides.Chem Rxiv. 2023 Nov.Version 2.
[2] Zhang X N, Lam A T, Cheng Q Q, et al. Discovery of an NAD+ analogue with enhanced specificity for PARP1. Chem Sci. 2022 Jan 27;13(7):1982-1991.
[3] Chen Y, Wang C. Profiling of Protein Carbonylations in Ferroptosis by Chemical Proteomics. Methods Mol Biol. 2022:2543:141-153.
[4] McKenna S M, Florea B I, Zisterer D M, et al. Probing the metalloproteome: an 8-mercaptoquinoline motif enriches minichromosome maintenance complex components as significant metalloprotein targets in live cells.RSC Chem Biol. 2024 Jun 25;5(8):776-786.

Biotin-PEG4-azide是一种不可切割的叠氮化生物素化试剂,广泛应用于蛋白质标记、分子成像检测和靶向治疗剂的开发等领域[1]。Biotin-PEG4-azide的叠氮化物基团在铜(I)催化的炔-叠氮化物环加成(CuAAC)反应中具有很高的活性,因此Biotin-PEG4-azide可以用生物素标记蛋白质,并允许用链亲和素检测或捕获蛋白质[2][3][4]

实验参考方法 Experimental Reference Method

Biotin-PEG4-Azide作为蛋白质标记和检测试剂:

1. Biotin-PEG4-Azide作为1.25mM浓度的原液保存在DMSO中。

2. Click reagent cocktail由以下成分混合配制: 1.7mM三甲基(苄基三唑基甲基)胺(TBTA)与DMSO:叔丁醇混合物(1:4 v/v),50mM硫酸铜,50mM三甲基(2-羧乙基)膦(TCEP),1.25mM Biotin-PEG4-Azide。

3. 将以上cocktail在室温下持续搅拌1小时。

4. 裂解HT-29细胞,用BCA法将裂解液归一化至1.5mg/mL蛋白浓度。

5. 取细胞裂解液样品1mL (1.5mg/mL)进行CuAAC偶联反应。

6. 每个细胞裂解液中分别加入110µL的click reagent cocktail,制成最终浓度为100µM TBTA,1mM CuSO4,1mM TCEP,25µM Biotin-PEG4-Azide的反应混合物。

7. 反应混合物在室温下持续搅拌1小时。

8. 蛋白质在-20°C的冷丙酮中沉淀过夜。

9. 将蛋白3000g, -9℃离心30分钟使沉淀。

10. 用冷甲醇洗涤颗粒,再溶解于200µL重构缓冲液(50mM碳酸氢铵,6M胍HCl, 10mM 2-巯基乙醇)中。

11. 将蛋白样品还原、烷基化,用胰蛋白酶在37℃下以1:25的胰蛋白酶/蛋白比消化16小时。

12. 用NeutrAvidin -琼脂糖树脂富集消化后的样品。

13. 捕获的蛋白被洗脱后用LC-MS/MS分析。

本协议仅提供了一个指南,应根据您的具体需要进行修改。

References:

[1] Wang L, Punzalan C, Bajrami B,et al. Multiplying Identifiability of Clickable Peptides Using One-Pot Tagging of Homologous Biotinyl Azides.Chem Rxiv. 2023 Nov.Version 2.

产品文档 Product Documents

Purity:>98.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
1309649-57-7
同义词
生物素-PEG4-叠氮
分子式
C20H36N6O6S
分子量
488.6 g/mol
保存条件
Store at -20°C
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
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计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol