AMPPD (Lumi-Phos Plus)是一种1,2-二氧环己烷衍生物，作为超灵敏的碱性磷酸酶化学发光底物，广泛应用于生物化学检测中。
Cas No.:122341-56-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
_1-3.$$$39978408@51.jpg');)
_1-9.$$$38538795@65.jpg');)
_1-9.$$$39112701@51.jpg');)
_1-7.$$$37316672@70.jpg');)
_366-372.$$$36198801@70.jpg');)
.$$$38565142@65.jpg');)
_1867-1883.$$$33248023@67.jpg');)
_eads6055.$$$39977546@45.jpg');)
_eadm9805.$$$40080571@45.jpg');)
_eadj3020.$$$39666821@45.jpg');)
_1-20.$$$39757301@28.jpg');)
_1-24.$$$38898113@28.jpg');)
_273-287.$$$36806353@46.jpg');)
_1-16.$$$37156877@44.jpg');)
_1-19.$$$37460805@44.jpg');)
_1291-1307.$$$34518654@46.jpg');)
AMPPD (Lumi-Phos Plus) is a 1,2-dioxetane derivative that serves as an ultrasensitive chemiluminescent substrate for alkaline phosphatase and is widely used in biochemical detection [1-2]. Under the catalysis of alkaline phosphatase, AMPPD undergoes dephosphorylation to form an unstable intermediate. This intermediate decomposes, leading to cleavage of the dioxetane structure and emission of light at a wavelength of 470nm, with the luminescence intensity being proportional to the concentration of alkaline phosphatase[3-4].
References:
[1] Yue L, Liu YJ. Mechanism of AMPPD Chemiluminescence in a Different Voice. J Chem Theory Comput. 2013 May 14;9(5):2300-12.
[2] Tu L, Wang Y, Yang Y, et al. Spectroscopic study of the authentic emitter of AMPPD chemiluminescence in alkaline aqueous solution. Phys Chem Chem Phys. 2010 Jul 7;12(25):6789-94.
[3] Cate RL, Ehrenfels CW, Wysk M, et al. Genomic Southern analysis with alkaline-phosphatase-conjugated oligonucleotide probes and the chemiluminescent substrate AMPPD. Genet Anal Tech Appl. 1991 May;8(3):102-6.
[3] Cate RL, Ehrenfels CW, Wysk M, et al. Genomic Southern analysis with alkaline-phosphatase-conjugated oligonucleotide probes and the chemiluminescent substrate AMPPD. Genet Anal Tech Appl. 1991 May;8(3):102-6.
[4] Hai Z, Li J, Wu J,, et al. Alkaline Phosphatase-Triggered Simultaneous Hydrogelation and Chemiluminescence. J Am Chem Soc. 2017 Jan 25;139(3):1041-1044.
AMPPD (Lumi-Phos Plus)是一种1,2-二氧环己烷衍生物，作为超灵敏的碱性磷酸酶化学发光底物，广泛应用于生物化学检测中[1-2]。AMPPD在碱性磷酸酶的催化下会脱去磷酸基团，形成一个不稳定的中间体，该中间体分解时二氧杂环丁烷结构断裂并发射出波长为470nm的光，其发光强度与碱性磷酸酶的浓度成正比[3-4]。
碱性磷酸酶活性检测
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
（1）酶样品制备：将含有碱性磷酸酶的样品（如细胞裂解上清液或免疫检测复合物）于50mM碳酸盐缓冲液（pH=9.5）中保存备用。
（2）碱性磷酸酶活性检测：反应体系包含0.0125-0.4mM AMPPD，50mM碳酸盐缓冲液（pH=9.5），1mM MgCl₂，总体积根据实验设定。室温孵育20分钟后，进行检测。
（3）光度计检测：使用发光光度计测量化学发光信号，可读取10秒或30秒内的平均光强度或积分光强度。
（4）胶片成像检测：对于膜上固定的碱性磷酸酶（如Western blot或点杂交），将膜与AMPPD底物孵育后，与摄影胶片接触进行曝光成像。
注意事项：
1）化学发光反应的最佳pH为9.0-9.5，在此条件下信噪比（酶促反应/非酶水解）最高。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Bronstein I, Edwards B, Voyta JC. 1,2-dioxetanes: novel chemiluminescent enzyme substrates. Applications to immunoassays. J Biolumin Chemilumin. 1989 Jul;4(1):99-111.
| Cas No. | 122341-56-4 | SDF | |
| 别名 | Lumi-Phos Plus; Lumigen PPD; PPD | ||
| Canonical SMILES | COC1(C2=CC(OP(O)(O)=O)=CC=C2)C3(C(C4)CC5CC4CC3C5)OO1 | ||
| 分子式 | C18H23O7P | 分子量 | 382.34 |
| 溶解度 | Water : ≥ 125 mg/mL (326.93 mM) | 储存条件 | Store at -20°C |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.6155 mL | 13.0774 mL | 26.1547 mL |
| 5 mM | 523.1 μL | 2.6155 mL | 5.2309 mL |
| 10 mM | 261.5 μL | 1.3077 mL | 2.6155 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet