Acridine Orange 10-Nonyl Bromide (Nonylacridine orange)
(Synonyms: 10-壬基溴代吖啶橙; Nonylacridine orange) 目录号 : GC30183
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Acridine Orange 10-Nonyl Bromide (Nonylacridine orange)是一种具有线粒体靶向性的荧光探针（激发波长：489nm；发射波长：525nm）。
Cas No.:75168-11-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Acridine Orange 10-Nonyl Bromide (Nonylacridine orange) is a mitochondria-targeting fluorescent probe (excitation wavelength: 489nm; emission wavelength: 525nm). When Acridine Orange 10-Nonyl Bromide interacts with cardiolipin, the excitation and emission wavelengths of the dye shift to 450nm and 640nm, respectively. Acridine Orange 10-Nonyl Bromide can be used in related studies such as mitochondrial morphology and localization, quantitative detection of cardiolipin, monitoring of cell apoptosis, and analysis of multidrug resistance[1-4].
References:
[1] Ferlini C, Scambia G. Assay for apoptosis using the mitochondrial probes, Rhodamine123 and 10-N-nonyl acridine orange. Nat Protoc. 2007;2(12):3111-4.
[2] Gohil VM, Gvozdenovic-Jeremic J, Schlame M, et al. Binding of 10-N-nonyl acridine orange to cardiolipin-deficient yeast cells: implications for assay of cardiolipin. Anal Biochem. 2005 Aug 15;343(2):350-2.
[3] Zhang GX, Kimura S, Murao K, et al. Inhibition of cytochrome c release by 10-N-nonyl acridine orange, a cardiolipin-specific dye, during myocardial ischemia-reperfusion in the rat. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2010 Feb;298(2):H433-9.
[4] Garcia Fernandez MI, Ceccarelli D, Muscatello U. Use of the fluorescent dye 10-N-nonyl acridine orange in quantitative and location assays of cardiolipin: a study on different experimental models. Anal Biochem. 2004 May 15;328(2):174-80.
Acridine Orange 10-Nonyl Bromide (Nonylacridine orange)是一种具有线粒体靶向性的荧光探针（激发波长：489nm；发射波长：525nm）。当Acridine Orange 10-Nonyl Bromide与心磷脂相互作用时，染料的激发和发射波长变为450nm和640nm。Acridine Orange 10-Nonyl Bromide可用于线粒体形态学与定位研究、心磷脂定量检测、细胞凋亡监测以及多药耐药性分析等相关研究[1-4]。
基于Acridine Orange 10-Nonyl Bromide (Nonylacridine orange测定心磷脂[1]
本实验方案根据研究内容整理，仅供参考，请根据实际需求进行调整。
1. 试剂准备：将Acridine Orange 10-Nonyl Bromide溶解于50:50（v/v）甲醇/水溶液中，配制成100µM的储备液，储存于4°C。使用时用50:50甲醇/水稀释至工作浓度（20µM）。
2. 样品预处理：对于全细胞样品，使用0.3N NaOH/0.1% SDS溶液裂解细胞。对于膜样品，使用含蛋白酶抑制剂的蔗糖-Tris缓冲液匀浆，并通过差速离心获得膜组分沉淀。向裂解液或膜沉淀中加入甲醇和氯仿，涡旋混合。加入去离子水后再次涡旋，离心（2000rpm，15分钟）。小心移取下层氯仿相，在40°C下用氮气吹干。干燥后的脂质样品用3mL 50:50甲醇/水复溶，用于后续分析。
3. 心磷脂的荧光检测：在复溶后的样品溶液中加入Acridine Orange 10-Nonyl Bromide工作液（20µM），用50:50甲醇/水补足至3mL体积，混合均匀。将反应体系在黑暗中静置孵育15分钟，以确保反应完全。随后立即测量荧光强度（激发波长：489nm；发射波长：525nm）。
注意事项：
（1）Acridine Orange 10-Nonyl Bromide染料对光敏感，所有涉及Acridine Orange 10-Nonyl Bromide的溶液配制和反应孵育步骤应在避光条件下进行。
（2）为确保Acridine Orange 10-Nonyl Bromide与心磷脂相互作用的特异性并避免表面活性剂干扰，测定溶剂中甲醇的比例应维持在50%或更高。
（3）反应体系的荧光信号在孵育3分钟后趋于稳定，并可保持至少15分钟，建议统一采用15分钟孵育时间。
（4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
References:
[1] Kaewsuya P, Danielson ND, Ekhterae D. Fluorescent determination of cardiolipin using 10-N-nonyl acridine orange. Anal Bioanal Chem. 2007 Apr;387(8):2775-82.
| Cas No. | 75168-11-5 | SDF | |
| 别名 | 10-壬基溴代吖啶橙; Nonylacridine orange | ||
| Canonical SMILES | CCCCCCCCC[N+]1=C2C=C(N(C)C)C=CC2=CC3=C1C=C(N(C)C)C=C3.[Br-] | ||
| 分子式 | C26H38BrN3 | 分子量 | 472.5 |
| 溶解度 | DMSO : 25 mg/mL (52.91 mM) | 储存条件 | Store at 2-8°C, protect from light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
||
| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1164 mL | 10.582 mL | 21.164 mL |
| 5 mM | 423.3 μL | 2.1164 mL | 4.2328 mL |
| 10 mM | 211.6 μL | 1.0582 mL | 2.1164 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
Quality Control & SDS
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