5(6)-FITC

目录号: GC33440纯度: >97.00%同义词: 异硫氰酸荧光素,Fluorescein 5(6)-isothiocyanate; Fluorescein isothiocyanate 5- and 6- isomers
5(6)-FITC是一种荧光染料衍生物,激发/发射波长约为492–495nm/518–521nm。

5(6)-FITC
Cas No.: 27072-45-3
规格价格库存数量操作
100mg¥350.00现货
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500mg¥1,050.00现货
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10mM (in 1mL DMSO)¥385.00现货
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文献被引

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  • Nature cover
    Nature
    641, 529–536 (2025)
  • Nature cover
    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
  • Cell cover
    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
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    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

5(6)-FITC is a fluorescent dye derivative with an excitation/emission wavelength of approximately 492–495nm/518–521nm [1]. The terminal isothiocyanate group (–N=C=S) of 5(6)-FITC can covalently bind to nucleophilic groups such as amino groups and sulfhydryl groups in proteins or nucleic acids [2]. 5(6)-FITC is often used to label biological molecules such as antibodies and oligonucleotides, which facilitates fluorescence microscopy observation, flow cytometry, ELISA, and Western blot experiments [3].

References:
[1]. Miller J S, Quarles J M. Flow cytometric identification of microorganisms by dual staining with FITC and PI[J]. Cytometry: The Journal of the International Society for Analytical Cytology, 1990, 11(6): 667-675.
[2]. Twining S S. Fluorescein isothiocyanate-labeled casein assay for proteolytic enzymes[J]. Analytical biochemistry, 1984, 143(1): 30-34.
[3]. Oddone N, Zambrana A I, Tassano M, et al. Cell uptake mechanisms of PAMAM G4-FITC dendrimer in human myometrial cells[J]. Journal of nanoparticle research, 2013, 15(7): 1776.

5(6)-FITC是一种荧光染料衍生物,激发/发射波长约为492–495nm/518–521nm [1]。5(6)-FITC的末端异硫氰酸酯基团(-N=C=S)可以与蛋白质或核酸中的氨基、巯基等亲核基团共价结合 [2]。5(6)-FITC常用于标记抗体、寡核苷酸等生物分子,方便荧光显微镜观察、流式细胞术、ELISA和蛋白质印迹实验 [3]

实验参考方法 Experimental Reference Method

本方案描述了如何使用5(6)-FITC标记蛋白质,用于后续荧光检测。实际实验条件可能需要根据检测设计进行优化 [1–2]

1. 试剂和材料

待标记蛋白质,5(6)-FITC,二甲基亚砜(DMSO),0.1M 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液,pH 8.3。

2. 蛋白质溶液的制备

将蛋白质溶于碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液中(终浓度为2-10mg/mL)。

3. 5(6)-FITC溶液的制备

将5(6)-FITC溶于DMSO中,终浓度为1-10mg/mL。新鲜配制,避光保存。

4. 标记反应

在轻轻搅拌下,将5(6)-FITC溶液逐滴加入蛋白质溶液中(建议摩尔比:每1mol蛋白质5-20mol 5(6)-FITC)。将反应混合物在室温(20-25℃)下避光孵育1-2小时(用箔纸包裹)。

5. 游离5(6)-FITC的去除

脱盐柱法:将反应混合物上样至预平衡的Sephadex G-25柱(加入PBS或所需缓冲液),并根据制造商的说明收集蛋白标记的级分。透析法:将混合物转移至透析管中(截止分子量10kDa),并在4℃下用1L PBS(或所选缓冲液)透析12-24小时,至少更换缓冲液3次。

6. 蛋白质和5(6)-FITC浓度的测定

通过280nm处的吸光度测量蛋白质浓度。通过495nm处的吸光度测量5(6)-FITC浓度。

注意事项

(1)始终在黑暗中处理5(6)-FITC,以避免光漂白。

(2)为获得最佳结果,请根据您的具体应用优化5(6)-FITC/蛋白质比例。

(3)将标记蛋白质分装,避光保存于-20℃。

References:

[1]. Chaganti L K, Venkatakrishnan N, Bose K. An efficient method for FITC labelling of proteins using tandem affinity purification[J]. Bioscience reports, 2018, 38(6): BSR20181764.

[2]. Hungerford G, Benesch J, Mano J F, et al. Effect of the labelling ratio on the photophysics of fluorescein isothiocyanate (FITC) conjugated to bovine serum albumin[J]. Photochemical & Photobiological Sciences, 2007, 6(2): 152-158.

产品文档 Product Documents

Purity:>97.00%

化学性质Chemical Properties

CAS 号
27072-45-3
同义词
异硫氰酸荧光素,Fluorescein 5(6)-isothiocyanate; Fluorescein isothiocyanate 5- and 6- isomers
SMILES
OC1=CC=C(C2(O3)C(C=C(N=C=S)C=C4)=C4C3=O)C(OC5=C2C=CC(O)=C5)=C1.OC6=CC=C(C7(O8)C(C=CC(N=C=S)=C9)=C9C8=O)C(OC%10=C7C=CC(O)=C%10)=C6
分子式
C21H11NO5S
分子量
389.38 g/mol
溶解性
DMSO : ≥ 156 mg/mL (400.64 mM)
保存条件
Store at 2-8°C, protect from light
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
评估样品解决方案:配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸:配备 RT,或根据请求配备蓝冰。

计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol