4-Hydroxymephenytoin

目录号: GC33522纯度: >99.50%同义词: 羟基香豆素
4-Hydroxymephenytoin是mephenytoin在人体内经CYP2C19催化的主要代谢产物,mephenytoin是一种抗癫痫药物,也是CYP2C19的典型底物。

4-Hydroxymephenytoin
Cas No.: 61837-65-8
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文献被引

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  • Nature cover
    Nature
    641, 529–536 (2025)
  • Nature cover
    Nature
    628, 630–638 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    632, 686–694 (2024)
  • Nature cover
    Nature
    618, 1017–1023 (2023)
  • Nature cover
    Nature
    610, 366–372 (2022)
  • Cell cover
    Cell
    187(9):2288-2304 (2024)
  • Cell cover
    Cell
    183(7):1867-1883 (2020)
  • Science cover
    Science
    388(6745) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6739) (2025)
  • Science cover
    Science
    387(6734) (2025)
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    Cell Research
    35, 97–116 (2025)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    34, 683–706 (2024)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 273–287 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 546–561 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    33, 904–922 (2023)
  • Cell Research cover
    Cell Research
    31, 1291–1307 (2021)

产品描述 Description

4-Hydroxymephenytoin is the major metabolite of mephenytoin in the human body catalyzed by CYP2C19, an anti-epileptic drug and a typical substrate of CYP2C19 [1]. 4-Hydroxymephenytoin is often used to develop ultra-performance liquid chromatography (UPLC) tandem mass spectrometry methods to evaluate CYP probe drugs and their related metabolites in human urine or plasma samples [2-3].

References:
[1]. Tanaka M, Kato K, Sudo KI, et al. Simple and selective assay of 4-hydroxymephenytoin in human urine using solid-phase extraction and high-performance liquid chromatography with electrochemical detection and its preliminary application to phenotyping test. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. 1996 Feb 9; 676(1): 87-94.
[2]. Stewart NA, Buch SC, Conrads TP, et al. A UPLC-MS/MS assay of the “Pittsburgh cocktail”: six CYP probe-drug/metabolites from human plasma and urine using stable isotope dilution. Analyst. 2011; 136(3): 605-612.
[3]. Zhou HH. CYP2C19 genotype determines enzyme activity and inducibility of S-mephenytoin hydroxylase. Clinica chimica acta. 2001 Nov 1; 313(1-2): 203-208.

4-Hydroxymephenytoin是mephenytoin在人体内经CYP2C19催化的主要代谢产物,mephenytoin是一种抗癫痫药物,也是CYP2C19的典型底物 [1]。4-Hydroxymephenytoin常用于开发超高效液相色谱(UPLC)串联质谱方法,以评估人尿液或血浆样本中的CYP探针药物及其相关代谢物 [2-3]

实验参考方法 Experimental Reference Method

本方案仅提供实验指导。实际应用需根据您的研究目标、表达体系和分析平台进行优化和调整 [1-2]

1. 试剂及材料准备:

CYP2C19酶源(例如人肝微粒体、转染表达细胞株或重组酶蛋白)。

探针底物:S-mephenytoin。

反应缓冲液:PBS。

NADPH辅酶:用于启动代谢反应。

有机溶剂:乙腈、甲醇,用于终止反应。

质谱内标:对映体内标。

4-Hydroxymephenytoin标准品:用于定量比对。

检测仪器:UPLC-MS/MS系统。

2. 反应体系配置:

(1) 将以下反应组分加入离心管(设计终体积为200μL):

Tris-HCl缓冲液(100mM,pH 7.4)。

CYP2C19酶源(终浓度:0.1-0.5mg/mL蛋白)。

S-mephenytoin(10-100μM,根据Km值优化)。

NADPH(1mM,立即配制)。

(2) 将混合物在37°C预热5分钟。

(3) 加入NADPH后,反应正式开始,并在37°C孵育20-60分钟。

3. 终止和提取:

(1) 反应完成后,立即加入等体积的冰冷乙腈或甲醇终止反应。

(2) 高速离心(13,000 rpm,10分钟),收集上清液进行后续检测。

4. 分析检测(UPLC-MS/MS):

(1) 使用UPLC-MS/MS分析4-Hydroxymephenytoin的浓度。

(2) 使用内标法或标准曲线法定量。

(3) 根据单位时间内产物的生成速率计算CYP2C19酶的活性。

5. 数据解释和应用:

通过比较4-Hydroxymephenytoin的生成速率来评估CYP2C19酶的表达或活性水平。

如果用于药物代谢分型,它可以用于区分快代谢者(EM)和慢代谢者(PM)。

它还可以用于抑制剂筛选、酶动力学研究或体外药物代谢评估。

操作注意事项:

1. S-mephenytoin为光敏性底物,避免强光照射。

2. NADPH必须在使用前即刻制备,以免反应体系氧化失活。

3. 建议使用同一批次的CYP酶源,以减少批次差异。

4. 保持反应体系pH值和温度恒定。

5. UPLC-MS/MS分析建议使用稳定同位素内标,以提高定量准确性。

References:

[1]. Stewart NA, Buch SC, Conrads TP, et al. A UPLC-MS/MS assay of the “Pittsburgh cocktail”: six CYP probe-drug/metabolites from human plasma and urine using stable isotope dilution. Analyst. 2011; 136(3): 605-612.

[2]. Zhou HH. CYP2C19 genotype determines enzyme activity and inducibility of S-mephenytoin hydroxylase. Clinica chimica acta. 2001 Nov 1; 313(1-2): 203-208.

产品文档 Product Documents

Purity:>99.50%

相关生物学数据Related Biological Data

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化学性质Chemical Properties

CAS 号
61837-65-8
同义词
羟基香豆素
SMILES
O=C1N(C)C(C(C2=CC=C(O)C=C2)(CC)N1)=O
分子式
C12H14N2O3
分子量
234.26 g/mol
溶解性
DMF: 25 mg/ml,DMSO: 25 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1): 0.5 mg/ml,Ethanol: 15 mg/ml
保存条件
Store at 4°C
General tips
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限:-80°C 储存时,请在 6 个月内使用,-20°C 储存时,请在 1 个月内使用。
为了提高溶解度,请将管子加热至 37°C,然后在超声波浴中震荡一段时间。
Shipping Condition
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计算工具摩尔浓度 / 稀释 / 分子量 / 单位换算 / 体内配方 / 溶解度

g/mol