3,3′-Dipropylthiadicarbocyanine (iodide)
(Synonyms: 碘化-3,3ˊ-二丙基硫杂二羰花青; DiSC3(5)) 目录号 : GC52109
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DiSC3(5) 是一种荧光探针，常用作示踪染料来评估线粒体膜电位。
Cas No.:53213-94-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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DiSC3(5) is a fluorescent probe commonly used as a tracer dye to evaluate mitochondrial membrane potential. The excitation/emission wavelength of DiSC3(5) is up to 622/670 nm. DiSC3(5) can inhibit the respiratory system associated with mitochondrial NAD, and the IC50 value is 8 μM. DiSC3(5) in the presence of Na+/K+-ATPase inhibitor ouabain 2 can induce membrane hyperpolarization of Ehrlich ascites tumor cells[1][2][3].
References:
[1]. Yamamoto T, et al. Multiple effects of DiS-C3(5) on mitochondrial structure and function. Eur J Biochem. 2004;271(17):3573-3579.
[2]. Sims PJ, et al. Studies on the mechanism by which cyanine dyes measure membrane potential in red blood cells and phosphatidylcholine vesicles. Biochemistry. 1974 Jul 30;13(16):3315-30.
[3]. Smith TC, et al. The effect of the fluorescent probe, 3,3'-dipropylthiodicarbocyanine iodide, on the membrane potential of Ehrlich ascites tumor cells. Biochem Biophys Res Commun. 1980 Jul 31;95(2):722-7.
DiSC3(5) 是一种荧光探针，常用作示踪染料来评估线粒体膜电位。DiSC3(5) 的激发/发射波长最大为 622/670 nm. DiSC3(5) 对线粒体 NAD 相关呼吸系统有抑制作用，IC50 值为 8 μM。DiSC3(5) 在Na+/K+-ATP 酶抑制剂 ouabain 2 的存在下可以诱导埃利希腹水肿瘤细胞的膜超极化。
1. 制备 DiSC3(5) 膜染色溶液：
1.1 制备 DMSO 或 EtOH 储备溶液：储备溶液应在 DMSO 或 EtOH 中以 1-5 mM 制备。
注 1)：储备溶液的未使用部分应储存在 -20℃。 避免反复冻/融循环。
1.2 准备工作溶液：将储备溶液稀释到合适的缓冲液中，如无血清培养基， HBSS 或 PBS ，制成 1 至5 uM 的工作溶液。
注2)：对于不同的细胞类型和/或实验条件，应根据经验确定工作溶液的浓度。建议在至少超过十倍范围的浓度下进行测试。
2. 将细胞染成悬浮液：
2.1 在染料工作溶液中悬浮细胞密度为 1×106/ mL。
2.2 在 37°C 孵育 2-20 分钟。 培养时间取决于细胞类型。 首先孵育 20 分钟，然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。
2.3 将标记的悬浮管以 1000 至 1500rpm 离心 5 分钟。
2.4 去除上清液，轻轻地将细胞重新悬浮在预热（37°C）的生长培养基中。
2.5 按步骤 2.3 和 2.4 洗涤两次。
3. 染色贴壁细胞：
3.1 在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。
3.2 从生长培养基中取出盖玻片，轻轻地排出多余的培养基。将盖玻片放在湿度箱中。
3.3 将100 μL 染料工作溶液吸移到盖玻片的角落，轻轻搅拌直至所有细胞都被覆盖。
3.4 将盖玻片在 37°C 孵育 2-20 分钟。 培养时间根据细胞类型而变化。开始孵育 20 分钟，然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。
3.5 排出染料工作溶液，用生长培养基清洗盖玻片两到三次。对于每个洗涤循环，用预热的生长培养基覆盖细胞，孵育 5-10 分钟，然后排出培养基。
4. 显微镜检测。
5. 流式细胞仪检测：
用 DiS 标记的细胞可使用常规 FL3 流式细胞仪检测通道进行分析。
| Cas No. | 53213-94-8 | SDF | Download SDF |
| 别名 | 碘化-3,3ˊ-二丙基硫杂二羰花青; DiSC3(5) | ||
| Canonical SMILES | CCCN1C(SC2=C1C=CC=C2)=CC=CC=CC3=[N+](CCC)C(C=CC=C4)=C4S3.[I-] | ||
| 分子式 | C25H27IN2S2 | 分子量 | 546.53 |
| 溶解度 | DMSO : 5.83 mg/mL (10.67 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | 储存条件 | 4°C, sealed storage, away from moisture and light |
| General tips | 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。 为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间。 |
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| Shipping Condition | 评估样品解决方案：配备蓝冰进行发货。所有其他可用尺寸：配备RT，或根据请求配备蓝冰。 | ||
| 制备储备液 | |||
 |
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.8297 mL | 9.1486 mL | 18.2973 mL |
| 5 mM | 365.9 μL | 1.8297 mL | 3.6595 mL |
| 10 mM | 183 μL | 914.9 μL | 1.8297 mL |
| 第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量） | ||||||||||
| 给药剂量 | mg/kg |  |
动物平均体重 | g | |
每只动物给药体积 | ul | |
动物数量 | 只 |
| 第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系GLPBIO为您提供正确的澄清溶液配方） | ||||||||||
| % DMSO % % Tween 80 % saline | ||||||||||
| 计算重置 | ||||||||||
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL saline，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
3. 以上所有助溶剂都可在 GlpBio 网站选购。
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